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帅牛

新虫 (初入文坛)

[求助] 电泳图出现了不该出现的条带，不知道是什么 已有1人参与

最近做ChIP后续实验，将获得目的基因跑完PCR 跑电泳，第一个是2000的marker，2、3是阳性对照，4、5是阴性对照，后面每两个孔是一个样本，都是同一个引物，引物大小就在250左右，按道理讲，阴性对照应该什么条带都没有，可是跑出来的胶图，阴性对照在100左右大小的地方出现条带，请问这是为什么呢？

电泳图出现了不该出现的条带，不知道是什么
电泳图
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1楼 2014-11-23 10:50:25
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黄裕正

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉应该是引物带。都在几十bp左右。你跑PCR引物加了多少？
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2楼2014-11-23 23:10:57
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帅牛

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 黄裕正 at 2014-11-23 23:10:57
感觉应该是引物带。都在几十bp左右。你跑PCR引物加了多少？

体系20μL，引物5μL，浓度2.5μM
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3楼2014-11-24 09:23:20
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黄裕正

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
帅牛: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-11-24 16:47:12
引用回帖:
3楼: Originally posted by 帅牛 at 2014-11-24 09:23:20
体系20μL，引物5μL，浓度2.5μM...

是引物带。不过你引物为什么配成2.5uM的呢？虽然总量是一样，但是理论上浓度越高，保存时间越长。当然，其实也无所谓，引物不值钱！
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4楼2014-11-24 10:32:08
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吕木木

新虫 (小有名气)
请问阴性对照的作用是什么，还有阳性对照的步骤怎么做啊，最近想跑P，检测一下是不是转基因，急死了

发自小木虫Android客户端
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5楼2016-01-25 01:25:12
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