应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » TA克隆 7.7Kb大片段
281/3返回列表123下一页
查看: 2620  |  回复: 27
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] TA克隆 7.7Kb大片段 已有11人参与

请教各位，7.7KB的大片段能够转进T载体吗？什么样子的T载体合适？转成功的关键点是什么？谢谢解答！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-11-17 09:55:41
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

百褶裙de夏天

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
czcpudai(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-11-18 18:16:05
用T载体克隆的话，2～3kb效率比较高，超过5kb难度就比较大了，效率很低。ClonExpress Entry One Step Cloning Kit这个盒子你可以试一下，里面有个CE Entry vector，你可以把片段克隆到这个载体上面去，这个载体可以克隆最长10kb的片段进去。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2014-11-18 09:07:07
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

MLN10000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-17 20:36:54
czcpudai: 金币+1, ★有帮助 2014-11-17 22:16:24
我认为可以 只要你计算好比例 祝你成功
赞一下 回复此楼
2楼2014-11-17 11:03:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caihang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-17 20:37:02
czcpudai: 金币+1, ★有帮助 2014-11-17 22:18:27
7.7K连上T载体难度很大，建议分段扩增，分段连接。
赞一下 回复此楼
3楼2014-11-17 11:04:14
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-17 20:37:09
czcpudai: 金币+1 2014-11-17 22:19:14
大片段的连接效率低是肯定的，连接的时候浓度要高。连接时间要长。
赞一下 回复此楼
学习再学习，努力再努力。
4楼2014-11-17 15:27:41
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-17 20:37:17
czcpudai: 金币+1 2014-11-17 22:19:58
片段当载体  载体当片段用
赞一下 回复此楼
5楼2014-11-17 17:06:28
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by MLN10000 at 2014-11-17 11:03:55
我认为可以 只要你计算好比例 祝你成功

您说的比例大概是怎么样的？我用的全式金的，说明书上知名载体与Insert的最佳摩尔比例为1:7，载体为pEASY-T载体。您做过这样子的连接吗？
赞一下 回复此楼
6楼2014-11-17 22:18:15
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by caihang at 2014-11-17 11:04:14
7.7K连上T载体难度很大，建议分段扩增，分段连接。

您好，您说的分段连接具体的做法是怎么样的？谢谢解答！
赞一下 回复此楼
7楼2014-11-17 22:18:58
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jian212 at 2014-11-17 15:27:41
大片段的连接效率低是肯定的，连接的时候浓度要高。连接时间要长。

效率确实会低？有成功的可能吗？哈哈，给自己涨点自信
赞一下 回复此楼
8楼2014-11-17 22:19:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-11-17 17:06:28
片段当载体  载体当片段用

谢谢！  怎么理解呢？
赞一下 回复此楼
9楼2014-11-17 22:20:11
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 czcpudai 的主题更新
281/3返回列表123下一页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-17 15:29 by 0ngsZVSCTS7z
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:27 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:53 by ObVzqQQh1rrE
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:17 by ObVzqQQh1rrE
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-17 05:38 by k06BKNblrGRH
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 3/150 2026-09-17 05:16 by k06BKNblrGRH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 5/250 2026-09-17 05:14 by k06BKNblrGRH
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:04 by k06BKNblrGRH
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 8/400 2026-09-17 01:38 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-17 01:16 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-16 19:15 by rRvxEj3zorCy
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-16 15:48 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-16 06:36 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 03:50 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:39 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 06:50 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭