24小时热门版块排行榜    

查看: 2247  |  回复: 27

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by czcpudai at 2014-11-17 22:20:11
谢谢!  怎么理解呢?...

就是 把7.7KB的大片段当载体用,把T载体当片段加。
11楼2014-11-18 09:47:44
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

维真生物

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
Penter载体用过吗

[ 发自小木虫客户端 ]
12楼2014-11-18 11:25:27
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

枫林123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
czcpudai(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-18 18:16:22
7.7Kb的大片段采用TA克隆很困难,你可以尝试用同源重组的方法。ClonExpress Entry One Step Cloning Kit这个试剂盒是采用的是同源重组的方法,插入大片段也没有问题。希望对你实验有帮助。
13楼2014-11-18 12:19:41
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木sigh

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 百褶裙de夏天 at 2014-11-18 09:07:07
用T载体克隆的话,2~3kb效率比较高,超过5kb难度就比较大了,效率很低。ClonExpress Entry One Step Cloning Kit这个盒子你可以试一下,里面有个CE Entry vector,你可以把片段克隆到这个载体上面去,这个载体可以 ...

我们实验室也是用的这个,当时我的载体长度大概跟楼主差不多,8K左右,试过好几个盒子都没做出来,后来一个师兄推荐的这家的盒子,一开始还是没做出来,问了他们的技术,也算是运气好吧,一次就转出来了,我只记得那个技术好温柔啊 哈哈哈
14楼2014-11-18 14:02:52
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a50044758

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
czcpudai(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-25 13:15:25
你把片段理解成载体,载体理解成片段就可以了,其实挺容易连进去的。
15楼2014-11-19 16:09:17
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

意萧02

木虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-11-25 13:15:37
我的片段5K,我也想问能连什么载体?

[ 发自小木虫客户端 ]
16楼2014-11-19 16:15:03
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
14楼: Originally posted by 小木sigh at 2014-11-18 14:02:52
我们实验室也是用的这个,当时我的载体长度大概跟楼主差不多,8K左右,试过好几个盒子都没做出来,后来一个师兄推荐的这家的盒子,一开始还是没做出来,问了他们的技术,也算是运气好吧,一次就转出来了,我只记得 ...

能问问怎么个温柔法吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
17楼2014-11-19 16:16:18
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zshw_001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这么大一个片段,最好切成小片段,分开克隆在连接吧。
永远相信未知的总是美好的!
18楼2014-11-19 17:09:20
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
18楼: Originally posted by zshw_001 at 2014-11-19 17:09:20
这么大一个片段,最好切成小片段,分开克隆在连接吧。

我这个片段还是overlap扩出来的,用来表达化合物的,但是想做个TA克隆测序、现在觉得不是太好做,所以寻求大家更好的解决方法!谢谢
19楼2014-11-20 21:21:45
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wendy73

禁虫 (初入文坛)

★ ★
czcpudai: 金币+2 2014-11-24 19:25:47
本帖内容被屏蔽

20楼2014-11-21 08:51:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 czcpudai 的主题更新
信息提示
请填处理意见