应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » TA克隆 7.7Kb大片段
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
281/3返回列表123下一页
查看: 2330  |  回复: 27
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] TA克隆 7.7Kb大片段 已有11人参与

请教各位，7.7KB的大片段能够转进T载体吗？什么样子的T载体合适？转成功的关键点是什么？谢谢解答！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-11-17 09:55:41
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

百褶裙de夏天

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
czcpudai(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-11-18 18:16:05
用T载体克隆的话，2～3kb效率比较高，超过5kb难度就比较大了，效率很低。ClonExpress Entry One Step Cloning Kit这个盒子你可以试一下，里面有个CE Entry vector，你可以把片段克隆到这个载体上面去，这个载体可以克隆最长10kb的片段进去。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2014-11-18 09:07:07
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

MLN10000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-17 20:36:54
czcpudai: 金币+1, ★有帮助 2014-11-17 22:16:24
我认为可以 只要你计算好比例 祝你成功
赞一下 回复此楼
2楼2014-11-17 11:03:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caihang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-17 20:37:02
czcpudai: 金币+1, ★有帮助 2014-11-17 22:18:27
7.7K连上T载体难度很大，建议分段扩增，分段连接。
赞一下 回复此楼
3楼2014-11-17 11:04:14
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-17 20:37:09
czcpudai: 金币+1 2014-11-17 22:19:14
大片段的连接效率低是肯定的，连接的时候浓度要高。连接时间要长。
赞一下 回复此楼
学习再学习，努力再努力。
4楼2014-11-17 15:27:41
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-17 20:37:17
czcpudai: 金币+1 2014-11-17 22:19:58
片段当载体  载体当片段用
赞一下 回复此楼
5楼2014-11-17 17:06:28
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by MLN10000 at 2014-11-17 11:03:55
我认为可以 只要你计算好比例 祝你成功

您说的比例大概是怎么样的？我用的全式金的，说明书上知名载体与Insert的最佳摩尔比例为1:7，载体为pEASY-T载体。您做过这样子的连接吗？
赞一下 回复此楼
6楼2014-11-17 22:18:15
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by caihang at 2014-11-17 11:04:14
7.7K连上T载体难度很大，建议分段扩增，分段连接。

您好，您说的分段连接具体的做法是怎么样的？谢谢解答！
赞一下 回复此楼
7楼2014-11-17 22:18:58
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jian212 at 2014-11-17 15:27:41
大片段的连接效率低是肯定的，连接的时候浓度要高。连接时间要长。

效率确实会低？有成功的可能吗？哈哈，给自己涨点自信
赞一下 回复此楼
8楼2014-11-17 22:19:51
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-11-17 17:06:28
片段当载体  载体当片段用

谢谢！  怎么理解呢？
赞一下 回复此楼
9楼2014-11-17 22:20:11
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 czcpudai 的主题更新
281/3返回列表123下一页
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600，320分求调剂 +16 大馋小子 2026-04-04 17/850 2026-04-06 07:58 by MOF_Catal
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学085600英一数二337分求调剂 +12 lyz0427 2026-04-03 12/600 2026-04-06 06:37 by houyaoxu
[有机交流] 3-溴吡啶-4-甲醛合成 10+3 雪糕也能爆炸 2026-03-31 9/450 2026-04-06 00:24 by nBu锂
[考研] 考研生物与医药调剂 +8 铁憨憨123425 2026-03-31 8/400 2026-04-05 20:28 by lys0704
[考研] 322求调剂 +3 嗯哼哼恒 2026-04-05 3/150 2026-04-05 19:52 by nepu_uu
[考研] 生物学308分求调剂（一志愿华东师大） +8 相信必会光芒万� 2026-04-05 10/500 2026-04-05 12:19 by Hdyxbekcb
[考研] 材料调剂 +9 革微桂 2026-04-04 9/450 2026-04-05 08:27 by 544594351
[考研] 313求调剂 +3 海日海日 2026-04-04 3/150 2026-04-05 07:48 by 544594351
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 10/500 2026-04-04 23:12 by 无际的草原
[考研] 283求调剂 +4 mcbbc 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:51 by imissbao
[考研] 292求调剂 +21 是妍子也是研子 2026-03-30 22/1100 2026-04-03 21:44 by qlm5820
[考研] 320调剂 +4 农业工程与信息� 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:40 by lbsjt
[考研] 336求调剂 +8 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-03 19:41 by lijunpoly
[考研] 303求调剂 +10 DLkz1314. 2026-03-30 10/500 2026-04-03 18:03 by Jimmyandyou
[考研] 英一数一408，总分284，二战真诚求调剂 +13 12.27 2026-03-30 15/750 2026-04-03 14:41 by 氮气气气
[考研] 工科341分调剂 +3 洛多罗 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:20 by 1753564080
[考研] 建环，能源，土木老师路过看一看！！！ +5 嘿嘿uu 2026-04-01 5/250 2026-04-03 11:47 by znian
[考研] 复试调剂 +3 bvzz 2026-04-01 3/150 2026-04-03 09:47 by 蓝云思雨
[考研] 272求调剂，接受跨专业调剂！ +4 闲鱼卢 2026-03-31 4/200 2026-04-02 11:18 by guyan1000
[考研] 083000环境科学与工程调剂，总分281 +4 橙子（胜意） 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭