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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR电泳很奇怪的事情 胶块变形
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youlizujuan

新虫 (小有名气)

[求助] PCR电泳很奇怪的事情 胶块变形 已有3人参与

点样前胶块正常 2%浓度 140V 35min 结果电泳到一半胶块中间出现横着的凹槽 请问这是怎么回事 今天突然就这样了 以前没遇到过
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1楼 2014-11-10 20:03:15
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yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人

【答案】应助回帖

★
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youlizujuan(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-10 22:12:02
我见过电泳过程温度过高，把胶融化掉了，不过这一般是周围向中间融化的，难道是制胶过程中混合不均匀，中间密度小，先融化了？

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2楼2014-11-10 20:07:57
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yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by yudaoqian88 at 2014-11-10 20:07:57
我见过电泳过程温度过高，把胶融化掉了，不过这一般是周围向中间融化的，难道是制胶过程中混合不均匀，中间密度小，先融化了？

其实这种情况是偶发的，如果不是经常碰到，再跑电泳就行了，有时候也找不出原因的！

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3楼2014-11-10 20:09:13
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youlizujuan

新虫 (小有名气)
下午跑了一块胶 中间凹了 我以为是没做好 又重新做了一块 结果跑完中间又凹进去了
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4楼2014-11-10 20:13:32
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shoufangche

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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youlizujuan(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-10 22:12:19
电压太高了，跑的时间也挺长的，胶融化了，可以把电泳槽放在冰水浴中再跑一次试试
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5楼2014-11-10 20:22:20
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yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by youlizujuan at 2014-11-10 20:13:32
下午跑了一块胶 中间凹了 我以为是没做好 又重新做了一块 结果跑完中间又凹进去了

没有遇到这种情况，还是换东西吧，把做胶的电泳液和电泳槽都换掉，电压调低一点，按理说这个东西像果冻一样平铺在板子上，不会出现中间凹下去的情况呀！

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6楼2014-11-10 22:20:23
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zkz38210098

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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电泳时的电压偏高，而且电泳时间也太长了。我们一般电泳时间不会超过30分钟，超过30分钟后胶块周围会开始融化。跑胶也没有必要跑那么长的时间的，只要你的条带跑出来就可以了。
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7楼2014-11-11 21:59:43
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