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静待一片天yu

新虫 (初入文坛)

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专业: 抗体工程学

[求助] 蛋白做ＷＢ没条带已有1人参与

最近做了一个蛋白（可能含有糖基化）的ＷＢ检测，ＷＢ全阴，但Ｅｌｉｓａ结果还可以，我知道Ｅｌｉｓａ阳性不一定代表ＷＢ也阳性，也试过非变性电泳，但是不理想（分子量不对）（本实验室非变性电泳技术有限，还请各位大侠出出主意），请各位高手给些建议。ＰＳ：用这个蛋白生产单抗的，用该蛋白做检测原，检抗体的。

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1楼2014-11-10 10:52:11

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绯红誓言

新虫 (初入文坛)

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专业: 抗体工程学

【答案】应助回帖

我也遇到过类似问题，解释是：“正巧抗体所识别抗原表位结构是空间结构，在还原Buffer作用下发生改变（因为都知道还原buffer等一系列处理，会使蛋白空间结构变成直链），导致变性后无法识别。”
此外，你说你们实验室有做非还原电泳分子量不对，Elisa检测正常，也映证了蛋白结构在非变性时与变性后结构不一样。

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2楼2015-06-29 22:49:59

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