24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3137  |  回复: 4

czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 细胞提取蛋白,做western blotting,怎么知道是提取总蛋白还是膜蛋白呢?

各位做过Western blotting的同仁们,本人最近要从细胞中提取蛋白做WB,通过与内参比较,看看药物对细胞内抗氧化蛋白表达量的影响,我想问一下,我提取的蛋白应该是胞内总蛋白呢,还是根据这些抗氧化蛋白在细胞中的位置来选择不同的提取试剂。每种蛋白在细胞内的位置已经找到,有的是在线粒体中,有的是在细胞质中,要是提取的话,该怎么选择试剂呢?由于是第一次接触这种情况,不是很懂,请各位帮助一下!谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oldflying

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
提取总蛋白就可以了吧,只需要与对照组在抗氧化蛋白相应的位置做比较就可以看出差别。分离不同细胞部位的蛋白质,操作起来难度还是比较大的。
一个人的努力和坚持!
2楼2013-01-05 08:29:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果你想提取不同细胞器中的蛋白,那就离心分离细胞器,如果是总蛋白,就加去垢剂。可溶性蛋白则不用去垢剂!
shine
3楼2013-01-05 08:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-11 21:20:40
如果你的目的基因定位在特定的细胞器里面,分离细胞器后目的蛋白的相对浓度会提高,对研究它的功能和调控也更方便。但是如果你不知道目的蛋白的定位,先提一个总蛋白做western就可以了。所谓可溶蛋白就是用超速离心后还存在在上清里面。如果是膜蛋白的话会和膜及亚细胞结构一起沉降下来。
4楼2013-01-05 08:45:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-11 21:20:50
你先对于你的目的蛋白质加以定位,看是在细胞的什么部位,然后在粉碎细胞时分级分离细胞成分,根据需要留下不同的细胞组分,在进行进一步分离,如果是膜蛋白则要用去垢剂或者表面活性剂,不要一次体总蛋白质,分离起来很麻烦的。
5楼2013-06-09 21:08:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 czcpudai 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂 +8 熊二想上岸 2026-04-04 8/400 2026-04-05 05:27 by houyaoxu
[考研] 280求调剂 +3 李rien 2026-04-04 3/150 2026-04-04 23:32 by lqwchd
[考研] 302分求调剂 一志愿安徽大学085601 +4 zyx上岸! 2026-04-04 4/200 2026-04-04 23:28 by wxiongid
[考研] 298求调剂 +5 zzz,,r 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:55 by 蓝云思雨
[考研] 348求调剂 +4 wukira 2026-04-04 4/200 2026-04-04 18:21 by macy2011
[考研] 283求调剂 +3 jiouuu 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:28 by jiouuu
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +9 哇呼哼呼哼 2026-04-02 9/450 2026-04-03 12:05 by 1753564080
[基金申请] 请问共同通讯和共同一作的认可度问题 10+4 psa1234 2026-04-01 10/500 2026-04-03 11:08 by Kittylucky
[考研] 273求调剂 +20 李芷新1 2026-03-31 20/1000 2026-04-03 09:58 by linyelide
[考研] 26考研调剂 +4 Wnz.20030617 2026-04-01 5/250 2026-04-02 16:11 by 1939136013狗壮
[考研] 085601一志愿中山大学深圳材料工程330求调剂 +8 pipiver 2026-03-30 8/400 2026-04-02 12:01 by ms629
[考研] 材料工程322分 +8 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 8/400 2026-04-02 11:53 by 3041
[考研] 求调剂,一志愿 南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +11 @taotao 2026-03-29 11/550 2026-04-02 10:04 by realme321
[考研] 085602化学工程268分蹲调剂 +8 月照花林。 2026-04-01 8/400 2026-04-01 22:08 by 无际的草原
[考研] 材料专业调剂 +5 啦啦啦哭 2026-03-31 6/300 2026-04-01 16:48 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +8 axibli 2026-04-01 8/400 2026-04-01 09:51 by 我的船我的海
[考研] 土木304求调剂 +5 顶级擦擦 2026-03-31 5/250 2026-04-01 08:15 by fdcxdystjk¥
[考研] 合肥区域性重点一本招收调剂 +4 6266jl 2026-03-30 8/400 2026-03-31 18:43 by 6266jl
[考研] 考研调剂求助 +7 13287130938 2026-03-31 7/350 2026-03-31 16:39 by 690616278
[考研] 293求调剂 +3 末未mm 2026-03-30 5/250 2026-03-30 17:23 by 王保杰33
信息提示
请填处理意见