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czcpudai

铜虫 (正式写手)

应助: 12 (小学生)
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虫号: 1626622
注册: 2012-02-19
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 细胞提取蛋白，做western blotting，怎么知道是提取总蛋白还是膜蛋白呢？

各位做过Western blotting的同仁们，本人最近要从细胞中提取蛋白做WB，通过与内参比较，看看药物对细胞内抗氧化蛋白表达量的影响，我想问一下，我提取的蛋白应该是胞内总蛋白呢，还是根据这些抗氧化蛋白在细胞中的位置来选择不同的提取试剂。每种蛋白在细胞内的位置已经找到，有的是在线粒体中，有的是在细胞质中，要是提取的话，该怎么选择试剂呢？由于是第一次接触这种情况，不是很懂，请各位帮助一下！谢谢！

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1楼2013-01-04 22:38:38

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zhang881007

金虫 (小有名气)

应助: 168 (高中生)
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虫号: 1300123
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专业: 生物化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

如果你想提取不同细胞器中的蛋白，那就离心分离细胞器，如果是总蛋白，就加去垢剂。可溶性蛋白则不用去垢剂！

shine

3楼2013-01-05 08:38:42

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