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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？
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考研水平

新虫 (初入文坛)

[求助] WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？

最近在做一个mpr2蛋白的WB，但是不知道mrp2蛋白的分子量，如何查一个蛋白的分子量？知道蛋白的分子量后，又如何根据分子量来选择分离胶的浓度？最好能给出蛋白分子量范围与分离胶浓度的关系。我是新手，还望各位大侠多多指教，感激不尽。。
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考研水平

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1楼 2013-05-19 16:42:34
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回帖置顶 ( 共有2个 )

gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+10, MolEPI+1, 很好很强大！ 2013-05-20 12:29:09
查一个蛋白的分子量有很多方法（不知道是什么物种，也不知道是mpr2还是mrp2就当是人类的mrp2来处理吧）：
第一种方法：
在NCBI里面搜索该基因mrp2，获得该蛋白的序列，然后再借助其他的网站完成蛋白分子量的计算
具体过程如下：
打开NCBI网站，输入你要查找的基因
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？

点击蛋白来源物种
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-1

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-2

查看蛋白序列
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-3

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-4

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-5

打开蛋白分子量计算的网页，粘贴入要计算的蛋白序列
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-6

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-7

[ Last edited by gyesang on 2013-5-19 at 17:34 ]
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2楼2013-05-19 17:15:15
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+10, 很好很强大！ 2013-05-20 12:29:49
amisking: 回帖置顶 2013-05-20 20:16:18
amisking: MolEPI+1 2013-05-20 20:16:24
第三种方法：
直接在google里面搜索 mrp2的分子量，然后查看一些抗体杂出来的目的条带位置或者看western图片，看mrp2条带的位置
打开google
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-8

点击一个抗体进入
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-9

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-10

或者查看图片
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-11

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-12

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-13

[ Last edited by gyesang on 2013-5-19 at 18:04 ]
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4楼2013-05-19 17:54:36
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gyesang

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【答案】应助回帖

关于蛋白分子量范围与分离胶浓度的关系，可参考这张图：

SDS-PAGE胶浓度与对蛋白的分辨率对应图
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-14
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5楼2013-05-19 18:04:07
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gyesang

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引用回帖:
6楼: Originally posted by 考研水平 at 2013-05-20 11:07:43
谢谢你详细的回答，对我的帮助非常大，只不过我只是个新虫而已，要不然绝对重金酬谢。:

没关系，助人不为金币！
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7楼2013-05-20 12:51:14
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+10, 很好很强大！ 2013-05-20 12:29:26
第二种方法：
打开uniprot网站，查找到人类的mrp2基因，查看序列
具体操作：
打开网页：
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-15

找到物种并点击打开
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-16
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-17

找到序列
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度？-18
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考研水平
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3楼2013-05-19 17:37:42
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考研水平

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
谢谢你详细的回答，对我的帮助非常大，只不过我只是个新虫而已，要不然绝对重金酬谢。:
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6楼2013-05-20 11:07:43
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考研水平

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
内容已删除
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8楼2013-05-20 16:00:57
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考研水平

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gyesang at 2013-05-19 17:54:36
第三种方法：
直接在google里面搜索 mrp2的分子量，然后查看一些抗体杂出来的目的条带位置或者看western图片，看mrp2条带的位置
打开google


点击一个抗体进入




或者查看图片





...

谢谢你的精心回答！非常感谢
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9楼2013-05-20 16:01:36
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考研水平

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by gyesang at 2013-05-20 12:51:14
没关系，助人不为金币！...

大侠果然又博学又有风度，敬佩敬佩！
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10楼2013-05-20 16:03:53
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