| 查看: 3399 | 回复: 5 | ||||
[交流]
【求助】WB过程中跑电泳时，蛋白质外漏
|
|
加完蛋白样品，在跑SDS聚丙烯酰胺电泳时，5min-10min的时候蛋白样品还没有有到达分离胶，甚至加样孔里的蛋白样品还没有全部进入浓缩胶的时候，一些孔的蛋白样品就从孔中沿着浓缩胶就漏了下来，流出来的样品沿着分离胶与浓缩胶的界限位置流到两侧，最近小弟经常遇到此类情况，特向各位高手求助，请各位高手多多指教！当然浓缩胶肯定凝固了，因为考虑到此情况，配完浓缩胶放了很久 谢谢 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白电泳 漏样 |
» 猜你喜欢
小木虫看见有人已经知道结果了
已经有9人回复
-
水蒸气蒸馏法乳化现象
已经有3人回复
-
时间戳他又来了
已经有8人回复
-
J-J-W不为人知的一面
已经有11人回复
-
自然基金已经彻底沦为学术资源的交换工具
已经有36人回复
-
全人类对于AI的整体认知，尚且停留在幼儿园启蒙阶段
已经有14人回复
-
没消息就是被刷了呗
已经有10人回复
-
27考博求助
已经有4人回复
-
深圳大学材料学院“智能分子材料团队”招聘博士后
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 打印了一季老友记
已经有5人回复
- 等待成绩的过程中，发邮件给导师询问 是否有机会 合适么？
已经有17人回复
- 通过红外鉴别蛋白质的构象
已经有4人回复
- 蛋白质中内毒素的去除
已经有9人回复
- 蛋白质测定过程中，紫外吸收信号增强
已经有8人回复
- WB电泳时，蛋白样品堵在上样口
已经有14人回复
- 了解蛋白质性质及其熟悉电泳的高手请进！
已经有11人回复
- 蛋白质电泳拖尾
已经有7人回复
- 时温叠加原理，时温等效原理
已经有10人回复
- SDS-PAGE电泳蛋白质变性
已经有7人回复
- Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助
已经有22人回复
- 请教高手 电泳为什么是蛋白质小分子跑在最下面
已经有10人回复
- 蛋白质电泳时浓缩胶浓度是如何选取的？
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于蛋白质电泳的配方
已经有3人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
求助2013年-2011年，武汉哪所学校的实验室合成过单价3万/克（或毫升）的剧毒成品？
+5/2490
-
诚征女友
+1/268
-
浙江理工大学能源催化团队诚聘专职教师/博士后
+2/234
-
中国石油大学（北京）未来能源学院“电催化能源工程”课题组博士后招聘
+1/171
-
上海 东华大学 刘栋良 招 2027 学术型博士（化学专业）
+1/78
-
没基金，自费做nature课题值得吗?
+1/61
-
厦门大学化学化工学院廖洪钢课题组招聘助理1名（全职）
+1/31
-
西安交通大学补亚忠课题组招聘2027年博士生
+1/31
-
深圳大学 招收2027级硕士/博士研究生 (推免/ 报考) 金属材料/ 3D打印/ 氢能等方向
+1/30
-
直博夏令营--北京理工大学/国家人工智能学院AI交叉学科联合招生
+1/28
-
哈尔滨工业大学物理学院光电材料和器件团队：招收2027级秋季和2028级春季博士生
+1/27
-
PEMFC耐久数据合作
+2/26
-
海南大学教职 入职要求 考核要求
+1/24
-
安徽医科大学马艳教授长期诚招优秀博士后人才加盟！
+1/22
-
淄博征女友
+1/19
-
一株吊兰
+1/19
-
中山大学孙逸仙纪念医院潘越教授团队招聘博士后和科研助理
+1/4
-
中山大学国家级青年人才课题组招收推免硕士2名（2027年入学）
+2/2
-
北京理工大学-集成电路与电子学院杰青团队-招博士后
+1/1
-
北京理工大学-集成电路与电子学院杰青团队-招博士后
+1/1
2楼2011-04-12 18:31:53
3楼2011-04-13 09:17:32
★ ★
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-04-13 13:21:47
qiang7(金币+1): 2011-04-14 19:20:35
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-04-13 13:21:47
qiang7(金币+1): 2011-04-14 19:20:35
|
从来没遇到过这种情况，猜想可能是浓缩胶配制有问题或者就是浓缩胶与分离胶分界面有问题，提出以下几点点建议供参考： 1. 配胶前将玻璃板彻底清洁，对光检查玻璃板表面是否光洁，最好是每次用完立即清洗，无尘晾干，下次用就比较方便了。 2.在配胶时，在加入TEMED之前充分混匀 3.在分离胶凝固之后尽量去掉上层压胶的液体，在倾倒去除后可以以滤纸吸掉残余液体，注意不要碰到分离胶 4.还有一般边上两个孔容易受到浓缩胶凝固收缩的影响使得两侧边缘的孔不是很完整，最好不要用，以空白loading buffer上样可以保证各泳道蛋白条带宽度一致 [ Last edited by ujsyangyong on 2011-4-13 at 12:48 ] |
4楼2011-04-13 12:43:56
5楼2011-04-13 16:34:40
6楼2015-03-30 11:49:51