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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 蛋白质测定过程中，紫外吸收信号增强
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ammingzhi

金虫 (正式写手)

[求助] 蛋白质测定过程中，紫外吸收信号增强

在用多角度激光散射测定蛋白质分子量过程中，处理样的紫外信号明显增强（进行了几次重复都一样），这表明芳香族氨基酸的增多吗？可是看有人报道我的这种处理不会造成氨基酸组成的显著变化，会不会是蛋白质结构的变化造成的？比如说构象等？我推测：有没有可能是由于更多的芳香族氨基酸暴露出来造成的，即处理前某些芳香族氨基酸被包裹，在检测时紫外信号检测不到，而处理后他们暴露出来，所以紫外信号增强。这种可能性存在吗？请高手指点，有参考资料的最好，多谢了。
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心怀感恩
1楼 2012-03-20 11:51:48
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
推荐蛋白质化学这一本书给你作参考，蓝移现象影响因素有很多，需要具体问题具体分析。
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2楼2012-03-20 13:27:20
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ammingzhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 留级生2005 at 2012-03-20 13:27:20:
推荐蛋白质化学这一本书给你作参考，蓝移现象影响因素有很多，需要具体问题具体分析。

不是蓝移呀 吸收峰的位置没有变化 是我的处理样比对照样吸收强度增加好多 表明芳香族氨基酸增多对吧？可是国外有人报道氨基酸组成不会发生大的变化 我觉得氨基酸组成也应该不至于变化 请再看下我的问题 望解答 谢谢
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心怀感恩
3楼2012-03-20 14:02:52
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healthyamy

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lovibond: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-21 22:59:49
要看是在哪个紫外波长增强的，氨基酸在紫外区都有吸收。芳香族氨基酸是强吸收，其他的氨基酸是弱吸收，波长也不同
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只要人不吃草，食品科学少不了
4楼2012-03-20 21:59:42
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ammingzhi

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by healthyamy at 2012-03-20 21:59:42:
要看是在哪个紫外波长增强的，氨基酸在紫外区都有吸收。芳香族氨基酸是强吸收，其他的氨基酸是弱吸收，波长也不同

我设定的280 nm 我说的也是这一波长下的变化
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心怀感恩
5楼2012-03-21 08:15:46
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xiaohuaiqiu

铁杆木虫 (知名作家)

Prof.

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议可以做一个波长扫描，看波长与处理前有什么变化。
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加油！
6楼2012-03-21 13:19:07
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)
★
lovibond: 金币+1, 感谢专家耐心应助 2012-03-21 23:00:09
引用回帖:
3楼: Originally posted by ammingzhi at 2012-03-20 14:02:52:
不是蓝移呀 吸收峰的位置没有变化 是我的处理样比对照样吸收强度增加好多 表明芳香族氨基酸增多对吧？可是国外有人报道氨基酸组成不会发生大的变化 我觉得氨基酸组成也应该不至于变化 请再看下我的问题 望解答 谢谢

我需要你告知具体样品的处理过程及大概实验过程，影响因素很多。例如：1.杂质，DNA含量260-280nm有影响，混入金属离子，缓冲液成分，2.处理样与对照样区别，3.温度4.蛋白质储存环境与条件等等。告诉我你的处理情况，大家帮你分析分析。
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ammingzhi
7楼2012-03-21 22:02:54
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ammingzhi

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 留级生2005 at 2012-03-21 22:02:54:
我需要你告知具体样品的处理过程及大概实验过程，影响因素很多。例如：1.杂质，DNA含量260-280nm有影响，混入金属离子，缓冲液成分，2.处理样与对照样区别，3.温度4.蛋白质储存环境与条件等等。告诉我你的处理情 ...

谢谢 我知道原因了 我把图放大后 发现：我的对照中的峰在处理样中分成了两个峰，多出一个很小的峰，应该是这样导致第一个峰的蛋白浓度降低 多以导致吸收强度增加。
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心怀感恩
8楼2012-03-22 08:24:14
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)
恭喜自查获得了结果。
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9楼2012-03-23 10:28:54
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