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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助】WB过程中跑电泳时，蛋白质外漏
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qiang7

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】WB过程中跑电泳时，蛋白质外漏

加完蛋白样品，在跑SDS聚丙烯酰胺电泳时，5min-10min的时候蛋白样品还没有有到达分离胶，甚至加样孔里的蛋白样品还没有全部进入浓缩胶的时候，一些孔的蛋白样品就从孔中沿着浓缩胶就漏了下来，流出来的样品沿着分离胶与浓缩胶的界限位置流到两侧，最近小弟经常遇到此类情况，特向各位高手求助，请各位高手多多指教！当然浓缩胶肯定凝固了，因为考虑到此情况，配完浓缩胶放了很久
谢谢
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蛋白电泳 漏样

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1楼 2011-04-11 08:57:38
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晴天1882

木虫 (正式写手)
qiang7(金币+1): 2011-04-13 09:13:24
qiang7(金币+1): 2011-04-25 14:55:05
会不会是分离胶中的聚丙酰胺没有聚合，蛋白没有孔径进入分离胶，一般30分钟左右分离胶都能聚合，TEMED的量不能太多，只是起加速聚合作用，多的话会使胶变硬，变脆，胶容易裂开，蛋白肯定就跑不进孔径里了。觉得可能还是胶哪里出了问题。
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2楼2011-04-12 18:31:53
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