| 查看: 3048 | 回复: 5 | ||||
[交流]
【求助】WB过程中跑电泳时，蛋白质外漏
|
|
加完蛋白样品，在跑SDS聚丙烯酰胺电泳时，5min-10min的时候蛋白样品还没有有到达分离胶，甚至加样孔里的蛋白样品还没有全部进入浓缩胶的时候，一些孔的蛋白样品就从孔中沿着浓缩胶就漏了下来，流出来的样品沿着分离胶与浓缩胶的界限位置流到两侧，最近小弟经常遇到此类情况，特向各位高手求助，请各位高手多多指教！当然浓缩胶肯定凝固了，因为考虑到此情况，配完浓缩胶放了很久 谢谢 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白电泳 漏样 |
» 猜你喜欢
免疫学博士有名额，速联系
已经有12人回复
-
面上基金申报没有其他的参与者成吗
已经有4人回复
-
退学或坚持读
已经有16人回复
-
青椒八年已不青，大家都被折磨成啥样了？
已经有16人回复
-
国家基金申请书模板内插入图片不可调整大小?
已经有8人回复
-
多组分精馏求助
已经有6人回复
-
国家级人才课题组招收2026年入学博士
已经有6人回复
-
交叉科学部支持青年基金，对三无青椒是个机会吗？
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 打印了一季老友记
已经有5人回复
- 等待成绩的过程中，发邮件给导师询问 是否有机会 合适么？
已经有17人回复
- 通过红外鉴别蛋白质的构象
已经有4人回复
- 蛋白质中内毒素的去除
已经有9人回复
- 蛋白质测定过程中，紫外吸收信号增强
已经有8人回复
- WB电泳时，蛋白样品堵在上样口
已经有14人回复
- 了解蛋白质性质及其熟悉电泳的高手请进！
已经有11人回复
- 蛋白质电泳拖尾
已经有7人回复
- 时温叠加原理，时温等效原理
已经有10人回复
- SDS-PAGE电泳蛋白质变性
已经有7人回复
- Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助
已经有22人回复
- 请教高手 电泳为什么是蛋白质小分子跑在最下面
已经有10人回复
- 蛋白质电泳时浓缩胶浓度是如何选取的？
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于蛋白质电泳的配方
已经有3人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
天津科技大学邓启良教授团队 招收2026年博士生
+1/81
-
中国石油大学（北京）国家级大人才团队博士招生2名：化学、材料、石油工程：油田化学
+2/73
-
博后平台选择
+1/73
-
关于本子打包
+1/64
-
时隔多年再次回到小木虫，有一番感慨
+1/58
-
大连工业大学 超临界流体技术团队（纺材学院）招收2026级“申请-考核制”博士生
+1/55
-
江西理工大学 稀土学院 稀土功能材料方向 招收2026届博士研究生、硕士研究生
+1/38
-
科罗拉多大学 Congjun Yu 课题组招聘
+1/36
-
南方医科大学生物医学工程学院招收申请考核制博士生2名、博士后2名（2026）
+1/32
-
教育部重点实验室和清华大学某国家重点实验室，联合培养硕生、博生，并长期招博士后
+1/30
-
加氢裂化
+1/13
-
西班牙巴塞罗那访学、博后、留学互动
+1/12
-
太原理工大学集成电路学院院长团队招收2026年博士研究生
+1/10
-
四川大学华西医院沈百荣教授课题组科研助理招聘启事
+1/9
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
+1/9
-
广东工业大学-木质纤维素高值化利用团队招博士研究生
+1/7
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
+1/6
-
武汉工程大学董志兵教授课题组招收博士/硕士研究生（长期有效）
+1/4
-
福建师范大学柔性电子学院 院士团队招2026级博士 光电器件、发光传感忆阻器
+1/2
-
双一流高校联合研究团队招收博士研究生
+1/1
2楼2011-04-12 18:31:53
3楼2011-04-13 09:17:32
★ ★
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-04-13 13:21:47
qiang7(金币+1): 2011-04-14 19:20:35
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-04-13 13:21:47
qiang7(金币+1): 2011-04-14 19:20:35
|
从来没遇到过这种情况，猜想可能是浓缩胶配制有问题或者就是浓缩胶与分离胶分界面有问题，提出以下几点点建议供参考： 1. 配胶前将玻璃板彻底清洁，对光检查玻璃板表面是否光洁，最好是每次用完立即清洗，无尘晾干，下次用就比较方便了。 2.在配胶时，在加入TEMED之前充分混匀 3.在分离胶凝固之后尽量去掉上层压胶的液体，在倾倒去除后可以以滤纸吸掉残余液体，注意不要碰到分离胶 4.还有一般边上两个孔容易受到浓缩胶凝固收缩的影响使得两侧边缘的孔不是很完整，最好不要用，以空白loading buffer上样可以保证各泳道蛋白条带宽度一致 [ Last edited by ujsyangyong on 2011-4-13 at 12:48 ] |
4楼2011-04-13 12:43:56
5楼2011-04-13 16:34:40
6楼2015-03-30 11:49:51