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考研水平

新虫 (初入文坛)

[求助] WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?

最近在做一个mpr2蛋白的WB,但是不知道mrp2蛋白的分子量,如何查一个蛋白的分子量?知道蛋白的分子量后,又如何根据分子量来选择分离胶的浓度?最好能给出蛋白分子量范围与分离胶浓度的关系。我是新手,还望各位大侠多多指教,感激不尽。。
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+10, 很好很强大! 2013-05-20 12:29:26
第二种方法:
打开uniprot网站,查找到人类的mrp2基因,查看序列
具体操作:
打开网页:
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?

找到物种并点击打开
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-1
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-2

找到序列
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-3

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3楼2013-05-19 17:37:42
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+10, MolEPI+1, 很好很强大! 2013-05-20 12:29:09
查一个蛋白的分子量有很多方法(不知道是什么物种,也不知道是mpr2还是mrp2就当是人类的mrp2来处理吧):
第一种方法:
在NCBI里面搜索该基因mrp2,获得该蛋白的序列,然后再借助其他的网站完成蛋白分子量的计算
具体过程如下:
打开NCBI网站,输入你要查找的基因
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-4

点击蛋白来源物种
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-5

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-6

查看蛋白序列
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-7

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-8

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-9

打开蛋白分子量计算的网页,粘贴入要计算的蛋白序列
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-10

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-11

[ Last edited by gyesang on 2013-5-19 at 17:34 ]
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2楼2013-05-19 17:15:15
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+10, 很好很强大! 2013-05-20 12:29:49
amisking: 回帖置顶 2013-05-20 20:16:18
amisking: MolEPI+1 2013-05-20 20:16:24
第三种方法:
直接在google里面搜索 mrp2的分子量,然后查看一些抗体杂出来的目的条带位置或者看western图片,看mrp2条带的位置
打开google
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-12

点击一个抗体进入
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-13

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-14

或者查看图片
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-15

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-16

WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-17

[ Last edited by gyesang on 2013-5-19 at 18:04 ]
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4楼2013-05-19 17:54:36
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gyesang

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【答案】应助回帖

关于蛋白分子量范围与分离胶浓度的关系,可参考这张图:

SDS-PAGE胶浓度与对蛋白的分辨率对应图
WB中如何根据蛋白质的分子量来选择分离胶的浓度?-18
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
5楼2013-05-19 18:04:07
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