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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 克隆菌液测序结果？
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jkamm

金虫 (正式写手)

[求助] 克隆菌液测序结果？ 已有1人参与

最近做某昆虫COI基因克隆，菌液测序后上NCBI比对，竞然与某种内生细菌相似性97%，无语了，什么原因啊？过程中一直有检测，有目的条带才送样的啊。为什么出现这种情况？求！！！
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1楼 2014-11-04 16:36:40
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289363400

铁杆木虫 (知名作家)

凌乱前进方向

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-11-05 09:43:28
如果不怕麻烦，可以提取质粒后做次PCR试试看。再者，会不会是引物的特异性较低引起的假阳性，观察PCR条带是否清晰、特异，亮度够不够亮。还有就是从新送样测序或者换家测序公司。
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2楼2014-11-04 21:38:10
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jkamm

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 289363400 at 2014-11-04 21:38:10
如果不怕麻烦，可以提取质粒后做次PCR试试看。再者，会不会是引物的特异性较低引起的假阳性，观察PCR条带是否清晰、特异，亮度够不够亮。还有就是从新送样测序或者换家测序公司。

谢谢！
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3楼2014-11-06 08:32:51
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