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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌落PCR明显有目标条带，酶切验证却不对，测序也没结果
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weilan-Joden

新虫 (初入文坛)

[交流] 菌落PCR明显有目标条带，酶切验证却不对，测序也没结果 已有6人参与

质粒双酶切，割胶回收，感觉还是有杂带，没有进I啊哦带一步纯化直接酶连，大肠长出来之后做菌落PCR，有一株菌有明显条带，但是提取质粒进行双酶切验证却没有切成功，用引物对质粒进行PCR，有两条非常明显的条带，这是为什么？
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1楼 2014-10-17 18:50:58
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alian1111

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
假阳性，我们也遇到过
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7楼2015-05-30 16:18:52
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)
菌落pcr经常有非特异性带

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2楼2014-10-17 22:16:23
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cnzpli

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我的pcr酶切都对就是测序不对

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-10-18 09:08:27
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593318518

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我觉得就是你的酶切位点突变了。测序就知道了
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4楼2014-10-18 10:36:05
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