24小时热门版块排行榜    

查看: 2852  |  回复: 4

525310523

木虫 (初入文坛)

[求助] 用pet28a当表达载体设计引物遇到问题了 已有4人参与

请教各位大神,我用pet28a当表达载体设计引物,用的是EcoR I和Sal I这两个酶切位点,下游引物我加了终止密码子,所以,后面的his标签是不表达的。现在比较纠结的是发现,Nde l 酶切位点和BamH I酶切位点之间都有ATG密码子,我担心它们中间表达的蛋白会不会跟我的目的蛋白结合在一起,会不会影响目的蛋白的结构?还有,前面的HIS标签应该能跟我的目的蛋白结合的吧?

用pet28a当表达载体设计引物遇到问题了
捕获.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圆yy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-10-16 11:23:08
525310523: 金币+1, 有帮助 2014-10-20 17:11:24
放心,别人设计的这个载体会读码乱码的,要不然设计出来有这个问题,那么这个载体就没有存在的意义啦,这点不用担心。
2楼2014-10-15 14:50:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bolysu

禁虫 (著名写手)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-10-16 11:23:13
本帖内容被屏蔽

3楼2014-10-15 21:18:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongmings

木虫之王 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-16 15:47:53
525310523: 金币+3, 有帮助 2014-10-20 17:11:47
和Nde l 酶切位点和BamH I酶切位点之间的ATG没有关系,从Nco1下面的那个ATG开始,一直到RcoR1之间的氨基酸都会连接在你目的蛋白的N端。一般不会影响你的结构,因为一般情况,N端不在蛋白质内部。
4楼2014-10-16 13:30:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
525310523: 金币+1, 有帮助 2014-10-20 17:12:08
核糖体结合到rbs上然后往下走,碰到第一个ATG开始翻译,直到碰见终止密码子翻译结束。
你所担心的问题不存在。
5楼2014-10-17 08:32:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 525310523 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +10 Zhao anqi 2026-03-22 10/500 2026-03-24 00:08 by Equinoxhua
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +7 纸鱼ly 2026-03-21 8/400 2026-03-23 23:31 by chixmc
[考研] 070300化学求调剂 +8 苑豆豆 2026-03-20 8/400 2026-03-23 20:57 by baobaoye
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +3 这么名字咋样 2026-03-22 4/200 2026-03-22 17:56 by 云民大李老师
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 305分求调剂(食品工程) +4 Sxy112 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:26 by 无懈可击111
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +4 NIFFFfff 2026-03-20 4/200 2026-03-22 09:49 by 2026paper
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 279求调剂 +5 红衣隐官 2026-03-21 5/250 2026-03-21 14:59 by lature00
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
信息提示
请填处理意见