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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于PEt-28a质粒载体表达蛋白质的问题
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zhouhou

捐助贵宾 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于PEt-28a质粒载体表达蛋白质的问题 已有7人参与

关于PEt-28a质粒载体表达蛋白质的问题，我的目的基因是3kb，酶切位点是BamHI,和SacI两个酶切位点，然后目的基因是从起始密码子到终止密码子的，构建的载体测序是对的，也转入到了大肠杆菌中，怎么就是表达不出来这个蛋白质？请各位大侠赐教。。。急急急急不知道咋办
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1楼 2010-11-14 19:05:28
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路人甲007

木虫 (正式写手)

小七
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你是用的什么菌株   你的表达条件是什么
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与人玫瑰手有余香
2楼2010-11-14 19:39:07
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zhouhou

捐助贵宾 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 路人甲007 at 2010-11-14 19:39:07:
你是用的什么菌株   你的表达条件是什么

BL21菌株，表达条件就是这个菌株培养的平常条件
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3楼2010-11-14 19:41:24
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zhouhou

捐助贵宾 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 路人甲007 at 2010-11-14 19:39:07:
你是用的什么菌株   你的表达条件是什么

这个会是什么原因导致的呢？菌落PCR也做了，质粒确实导入进去了，就是表达不出来，会不会是基因片段太大了？
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4楼2010-11-14 19:42:33
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)
有些基因是很难表达的。
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5楼2010-11-14 21:02:12
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)
★
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食科的，搞什么基因啊？毕业之后找不到工作的。
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6楼2010-11-14 21:03:01
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biogefart

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by hihoney at 2010-11-14 21:03:01:
食科的，搞什么基因啊？毕业之后找不到工作的。

这个纯属插科打诨贴 建议删除
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闹太套
7楼2010-11-14 21:34:06
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muchong5577

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有些基因就是不表达的啊，你以为转个基因进去就能表达啊。
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8楼2010-11-14 22:10:51
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lingorling

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
有没有稀有密码子
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9楼2011-12-14 14:38:44
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wytwsm

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
换一下菌株吧，用rossita试试
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10楼2011-12-14 18:03:15
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