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wxl.1989822金虫 (小有名气)
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pET28a载体蛋白表达为包涵体
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RT 本人最近在做利用pET28a载体表达纯化蛋白，菌是BL21，最近连续两次跑胶都是破碎后沉淀有目的条带，上清非常淡条带。具体实验步骤也就是：诱导后菌体4度离心后破碎，不过破碎后我采用的是常温离心10分钟左右，会不会是因为这样引起的蛋白被沉淀了？注：诱导采用的是终浓度0.2 0.4 0.6 0.8 1.0的梯度。诱导温度25和37结果差不多。 |
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 质粒构建 |
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gaojuan1985
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试试ArcticExpress Competent Cells，我用的载体和你一样，蛋白可溶性很好。 http://www.chem-agilent.com/pdf/strata/230191.pdf |
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