24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 825  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hua546

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩不出目的条带 已有2人参与

各位虫友好,本人刚刚接触生物领域,需要扩增的目的基因长度为3696bp,设计了两次引物,做了三次梯度PCR,都没能见到目的条带,反而出现了2000多bp的条带,我不知道原因到底在哪里,向各位请教一下。引物特异性?基因过长?(顺便问一下我这个基因有点长,是否会影响之后的表达转化实验)。先谢谢了,实验刚刚起步就因为这个歌耽误了太多时间,实在着急。

PCR扩不出目的条带
捕获.PNG


PCR扩不出目的条带-1
捕获2.PNG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天地一微尘

铁杆木虫 (小有名气)

可以试着延长一下延伸的时间。而且你其中有两个孔道也有条带出现,不过很弱而已,可以试着回收后作为模板来再扩增一次。
4楼2014-10-14 07:14:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

反应链

新虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-10-14 00:43:44
1图,非特异扩增。建议尝试2XGCBuffer。

2图,不好说,可切胶做TA克隆,送测序。
2楼2014-10-13 23:22:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

learningying

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-10-14 00:43:50
片段有些偏大了,你可以尝试做重叠延伸PCR。。。这样应该是可以坐出来的。不麻烦,很简单。。。你试试  好运!~
加油,天道酬勤
3楼2014-10-13 23:45:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hua546

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by learningying at 2014-10-13 23:45:10
片段有些偏大了,你可以尝试做重叠延伸PCR。。。这样应该是可以坐出来的。不麻烦,很简单。。。你试试  好运!~

嗯嗯,正在了解重叠延伸PCR,多谢啦
5楼2014-10-14 09:36:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 0856求调剂 +11 zhn03 2026-03-25 12/600 2026-03-28 13:32 by 唐沐儿
[考研] 322求调剂 +5 旧吢 2026-03-24 5/250 2026-03-28 13:26 by Iveryant
[考研] 321求调剂 +6 材料cailiao 2026-03-21 6/300 2026-03-28 13:14 by 唐沐儿
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 283求调剂 +7 A child 2026-03-28 7/350 2026-03-28 12:05 by zllcz
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 085600材料与化工调剂 +10 A-哆啦Z梦 2026-03-23 16/800 2026-03-27 15:13 by caszguilin
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +4 举个栗子oi 2026-03-24 5/250 2026-03-26 23:15 by 不吃魚的貓
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 347求调剂 +4 L when 2026-03-25 4/200 2026-03-25 13:37 by cocolv
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 一志愿东华大学化学070300,求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
信息提示
请填处理意见