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hua546

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
帖子: 10
在线: 1.6小时
虫号: 3418779
注册: 2014-09-15
专业: 病原细菌与放线菌生物学

[求助] PCR扩不出目的条带已有2人参与

各位虫友好，本人刚刚接触生物领域，需要扩增的目的基因长度为3696bp，设计了两次引物，做了三次梯度PCR，都没能见到目的条带，反而出现了2000多bp的条带，我不知道原因到底在哪里,向各位请教一下。引物特异性？基因过长？（顺便问一下我这个基因有点长，是否会影响之后的表达转化实验）。先谢谢了，实验刚刚起步就因为这个歌耽误了太多时间，实在着急。

PCR扩不出目的条带

捕获.PNG

PCR扩不出目的条带-1

捕获2.PNG

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【求助/交流】PCR后没有目的条带，有非特异性条带，求解决办法？？已经有20人回复

1楼2014-10-13 22:42:52

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反应链

新虫 (正式写手)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 397.3
散金: 339
红花: 16
帖子: 358
在线: 183.1小时
虫号: 3334128
注册: 2014-07-22
性别: GG
专业: 免疫学

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-10-14 00:43:44

1图，非特异扩增。建议尝试2XGCBuffer。

2图，不好说，可切胶做TA克隆，送测序。

2楼2014-10-13 23:22:16

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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