24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 827  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hua546

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩不出目的条带 已有2人参与

各位虫友好,本人刚刚接触生物领域,需要扩增的目的基因长度为3696bp,设计了两次引物,做了三次梯度PCR,都没能见到目的条带,反而出现了2000多bp的条带,我不知道原因到底在哪里,向各位请教一下。引物特异性?基因过长?(顺便问一下我这个基因有点长,是否会影响之后的表达转化实验)。先谢谢了,实验刚刚起步就因为这个歌耽误了太多时间,实在着急。

PCR扩不出目的条带
捕获.PNG


PCR扩不出目的条带-1
捕获2.PNG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hua546

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by learningying at 2014-10-13 23:45:10
片段有些偏大了,你可以尝试做重叠延伸PCR。。。这样应该是可以坐出来的。不麻烦,很简单。。。你试试  好运!~

嗯嗯,正在了解重叠延伸PCR,多谢啦
5楼2014-10-14 09:36:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

反应链

新虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-10-14 00:43:44
1图,非特异扩增。建议尝试2XGCBuffer。

2图,不好说,可切胶做TA克隆,送测序。
2楼2014-10-13 23:22:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

learningying

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-10-14 00:43:50
片段有些偏大了,你可以尝试做重叠延伸PCR。。。这样应该是可以坐出来的。不麻烦,很简单。。。你试试  好运!~
加油,天道酬勤
3楼2014-10-13 23:45:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天地一微尘

铁杆木虫 (小有名气)

可以试着延长一下延伸的时间。而且你其中有两个孔道也有条带出现,不过很弱而已,可以试着回收后作为模板来再扩增一次。
4楼2014-10-14 07:14:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085701求调剂初试286分 +4 secret0328 2026-03-28 4/200 2026-03-28 21:09 by 15366876211
[考研] 本科新能源科学与工程,一志愿华理能动285求调剂 +7 AZMK 2026-03-28 11/550 2026-03-28 21:01 by xxxsssccc
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +7 幸运哩哩 2026-03-22 11/550 2026-03-28 20:27 by 唐沐儿
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 339求调剂,想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +7 hanamiko 2026-03-27 7/350 2026-03-28 09:56 by 李上岸0921
[考研] 287求调剂 +10 land xuxu 2026-03-26 10/500 2026-03-27 15:33 by 帕尔马拉特
[考研] 085600,材料与化工321分,求调剂 +9 大馋小子 2026-03-27 9/450 2026-03-27 14:30 by mmm just
[考研] 0703化学338求调剂! +6 Zuhui0306 2026-03-26 7/350 2026-03-27 10:35 by shangxh
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
[考研] 325求调剂 +3 Aoyijiang 2026-03-23 3/150 2026-03-26 20:46 by 不吃魚的貓
[考研] 340求调剂 +3 Amber00 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:57 by 不吃魚的貓
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-23 4/200 2026-03-25 17:04 by CoderLoser
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
信息提示
请填处理意见