24小时热门版块排行榜    

查看: 3910  |  回复: 23
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

960550050

铁虫 (小有名气)

[求助] PBI121载体与目的片段连接后双酶切问题 已有1人参与

我将PBI121载体与我的克隆载体同时用Xba1和Sac1双酶切后胶回收,连接,转化的到肠杆菌,涂板,有菌落长出,挑单菌落,菌液PCR验证,正确,提质粒后PCR验证也正确,可是再进行双酶切验证时总是切不开,酶切产物有条带,只是就一个条带,请问大家这是怎么回事啊?!急!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

960550050

铁虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by gaohuihui at 2014-10-07 18:12:20
如果没有环形marker,你上样时就多点几微升,若是没切开的质粒应该有三条带的,只是上面两条带稍微淡一点...

哦,谢谢啊,我今天把质粒跟酶切产物一起跑电泳,结果在一条线上,那是不是能说明没有切开啊,谢谢啊
7楼2014-10-07 19:19:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)

感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 屏蔽内容, 重复 2014-10-07 18:25:46
本帖内容被屏蔽

2楼2014-10-07 16:25:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
960550050: 金币+5 2014-10-07 16:47:17
只有一条带,是单酶切大小的条带么?如果是的话,你用两个酶分别单切,看一下是哪个酶切位点有问题再说
3楼2014-10-07 16:26:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

960550050

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gaohuihui at 2014-10-07 16:25:33
只有一条带,是单酶切大小的条带么?如果是的话,你用两个酶分别单切,看一下是哪个酶有问题再说

怎么看是不是但酶切大小的条带呢,如果是没有切开不是也有一条带吗,条带大小大于15000bp
4楼2014-10-07 16:39:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 16:45 by Z9YWQ5EAO3qp
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 16:33 by Z9YWQ5EAO3qp
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 6/300 2026-09-30 16:26 by Z9YWQ5EAO3qp
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意! +10 zju2000 2026-09-26 13/650 2026-09-30 10:26 by yexuqing
[有机交流] 同一个分子,一条来自文献,一条来自AI——不告诉你答案,你会选哪条? +4 tianxiaoxian 2026-09-28 7/350 2026-09-30 08:34 by 88817753
[博后之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
请填处理意见