北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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960550050

铁虫 (小有名气)

[求助] PBI121载体与目的片段连接后双酶切问题 已有1人参与

我将PBI121载体与我的克隆载体同时用Xba1和Sac1双酶切后胶回收,连接,转化的到肠杆菌,涂板,有菌落长出,挑单菌落,菌液PCR验证,正确,提质粒后PCR验证也正确,可是再进行双酶切验证时总是切不开,酶切产物有条带,只是就一个条带,请问大家这是怎么回事啊?!急!!
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960550050

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by gaohuihui at 2014-10-07 19:24:51
嗯  是...

前面的菌液PCR和质粒PCR都能出来是不是说明已经连接上了啊
10楼2014-10-08 08:14:21
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查看全部 24 个回答

gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)

感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 屏蔽内容, 重复 2014-10-07 18:25:46
本帖内容被屏蔽

2楼2014-10-07 16:25:33
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gaohuihui

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
960550050: 金币+5 2014-10-07 16:47:17
只有一条带,是单酶切大小的条带么?如果是的话,你用两个酶分别单切,看一下是哪个酶切位点有问题再说
3楼2014-10-07 16:26:28
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960550050

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gaohuihui at 2014-10-07 16:25:33
只有一条带,是单酶切大小的条带么?如果是的话,你用两个酶分别单切,看一下是哪个酶有问题再说

怎么看是不是但酶切大小的条带呢,如果是没有切开不是也有一条带吗,条带大小大于15000bp
4楼2014-10-07 16:39:52
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