24小时热门版块排行榜    

查看: 4404  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

rriangle

新虫 (初入文坛)

[求助] 求帮忙!!目的基因Ct值很高 已有2人参与

本人是新手,最近在做荧光定量PCR,用的是THERMO公司的仪器,cDNA稀释10倍后,内参GADPH ct值都在25左右,但是几个目的基因都在30多,要不然就是非数字,然后我又把cDNA稀释5倍,GADPH ct值在15左右,目的基因还是在30多,要不然就是非数字,好不容易有个目的基因跑出来了,结果实验组的相对量比对照组还低,我想知道是引物不好么?我的引物是生工的,还有内参跑出来了是不是说明我的cDNA没有问题?因为我是组织,以前也没做过,我怕被我污染了,多谢各位大神赐教啊。。。!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷素雪

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yzj926521 at 2014-09-19 16:54:24
目的基因表达量太低了,试一下2倍稀释或者用25ul体系扩增,多换条件试试吧
我最近做的一个基因也是表达量很低,ct都大于30了,正在调整中

你好,如果目的基因的表达量太低的话,不可以cDNA稀释的时候,目的基因用一个稀释度,内参基因用一个稀释度吗?
9楼2018-12-13 16:37:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

yzj926521

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
目的基因表达量太低了,试一下2倍稀释或者用25ul体系扩增,多换条件试试吧
我最近做的一个基因也是表达量很低,ct都大于30了,正在调整中
2楼2014-09-19 16:54:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-19 23:49:23
"cDNA稀释10倍后,内参GADPH ct值都在25左右" vs. "又把cDNA稀释5倍,GADPH ct值在15左右"

楼主你到PCR很有问题, 不可能两倍的模版浓度会产生这么大的Ct差距
3楼2014-09-19 19:38:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rriangle

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by bullfrog325 at 2014-09-19 19:38:25
"cDNA稀释10倍后,内参GADPH ct值都在25左右" vs. "又把cDNA稀释5倍,GADPH ct值在15左右"

楼主你到PCR很有问题, 不可能两倍的模版浓度会产生这么大的Ct差距

那到底是哪里出现问题了呢`
4楼2014-09-28 22:37:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 22/1100 2026-08-20 17:03 by yaoyewhu2008
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+3 snowwithsea 2026-08-19 12/600 2026-08-20 15:56 by lfy8008
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见