应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求帮忙！！目的基因Ct值很高
51/1返回列表
查看: 4099  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

rriangle

新虫 (初入文坛)

[求助] 求帮忙！！目的基因Ct值很高 已有2人参与

本人是新手，最近在做荧光定量PCR，用的是THERMO公司的仪器，cDNA稀释10倍后，内参GADPH ct值都在25左右，但是几个目的基因都在30多，要不然就是非数字，然后我又把cDNA稀释5倍，GADPH ct值在15左右，目的基因还是在30多，要不然就是非数字，好不容易有个目的基因跑出来了，结果实验组的相对量比对照组还低，我想知道是引物不好么？我的引物是生工的，还有内参跑出来了是不是说明我的cDNA没有问题？因为我是组织，以前也没做过，我怕被我污染了，多谢各位大神赐教啊。。。！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-09-19 12:53:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-09-19 23:49:23
"cDNA稀释10倍后，内参GADPH ct值都在25左右" vs. "又把cDNA稀释5倍，GADPH ct值在15左右"

楼主你到PCR很有问题， 不可能两倍的模版浓度会产生这么大的Ct差距
赞一下 回复此楼
3楼2014-09-19 19:38:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

yzj926521

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
目的基因表达量太低了，试一下2倍稀释或者用25ul体系扩增，多换条件试试吧
我最近做的一个基因也是表达量很低,ct都大于30了，正在调整中
赞一下 回复此楼
2楼2014-09-19 16:54:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rriangle

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bullfrog325 at 2014-09-19 19:38:25
"cDNA稀释10倍后，内参GADPH ct值都在25左右" vs. "又把cDNA稀释5倍，GADPH ct值在15左右"

楼主你到PCR很有问题， 不可能两倍的模版浓度会产生这么大的Ct差距

那到底是哪里出现问题了呢`
赞一下 回复此楼
4楼2014-09-28 22:37:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

by小宁

木虫 (初入文坛)
亲  你后来怎么解决的啊？
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2015-07-08 14:25:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 材料复试调剂 +3 学材料的点 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:07 by ccp273206157
[考研] 292求调剂 +6 yhk_819 2026-02-28 6/300 2026-03-01 23:23 by 向上的胖东
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 8/400 2026-03-01 22:50 by jian_
[基金申请] 成果系统访问量大，请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦，已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 0805总分292，求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 化工专硕342，一志愿大连理工大学，求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭