24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 4144  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

rriangle

新虫 (初入文坛)

[求助] 求帮忙!!目的基因Ct值很高 已有2人参与

本人是新手,最近在做荧光定量PCR,用的是THERMO公司的仪器,cDNA稀释10倍后,内参GADPH ct值都在25左右,但是几个目的基因都在30多,要不然就是非数字,然后我又把cDNA稀释5倍,GADPH ct值在15左右,目的基因还是在30多,要不然就是非数字,好不容易有个目的基因跑出来了,结果实验组的相对量比对照组还低,我想知道是引物不好么?我的引物是生工的,还有内参跑出来了是不是说明我的cDNA没有问题?因为我是组织,以前也没做过,我怕被我污染了,多谢各位大神赐教啊。。。!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

by小宁

木虫 (初入文坛)

亲  你后来怎么解决的啊?
5楼2015-07-08 14:25:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

yzj926521

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
目的基因表达量太低了,试一下2倍稀释或者用25ul体系扩增,多换条件试试吧
我最近做的一个基因也是表达量很低,ct都大于30了,正在调整中
2楼2014-09-19 16:54:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-19 23:49:23
"cDNA稀释10倍后,内参GADPH ct值都在25左右" vs. "又把cDNA稀释5倍,GADPH ct值在15左右"

楼主你到PCR很有问题, 不可能两倍的模版浓度会产生这么大的Ct差距
3楼2014-09-19 19:38:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rriangle

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by bullfrog325 at 2014-09-19 19:38:25
"cDNA稀释10倍后,内参GADPH ct值都在25左右" vs. "又把cDNA稀释5倍,GADPH ct值在15左右"

楼主你到PCR很有问题, 不可能两倍的模版浓度会产生这么大的Ct差距

那到底是哪里出现问题了呢`
4楼2014-09-28 22:37:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 070300化学279求调剂 +18 哈哈哈^_^ 2026-04-08 19/950 2026-04-11 12:46 by zhq0425
[考研] 312求调剂 +5 李鸿飞飞 2026-04-06 5/250 2026-04-11 11:59 by Delta2012
[考研] 262求调剂 +11 天下第一文 2026-04-04 14/700 2026-04-11 11:59 by zhq0425
[考研] 085410 273分调剂 +3 X1999 2026-04-09 3/150 2026-04-11 11:50 by zhq0425
[考研] 343求调剂 +8 王国帅 2026-04-10 8/400 2026-04-11 10:50 by qingpingzhu
[考研] 农业管理302分求调剂 +3 xuening1 2026-04-10 3/150 2026-04-11 10:18 by zhq0425
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 0854调剂 +4 长弓傲 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:18 by 猪会飞
[考研] 求调剂 +9 张番茄不炒蛋 2026-04-10 10/500 2026-04-10 22:07 by 小小虫瓜
[考研] 求调剂288 +6 ioodiiij 2026-04-10 8/400 2026-04-10 21:07 by zhouxiaoyu
[考研] 本科西工大 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:00 by 来看流星雨10
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 269求调剂 +10 啊啊我我 2026-04-07 10/500 2026-04-10 10:38 by 高维春
[考研] 生物学求调剂 一志愿沪9,326分 +7 刘墨墨 2026-04-06 7/350 2026-04-10 08:11 by kangsm
[考研] 生物学调剂,一志愿西南大学348,Top期刊一区二作、二区三作,三等奖学金三次 +4 candyyyi 2026-04-09 4/200 2026-04-09 18:39 by l_paradox
[考研] 材料调剂 +14 一样YWY 2026-04-06 14/700 2026-04-08 23:00 by 猪会飞
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
[考研] 292求调剂 +4 lilllllxccc 2026-04-05 5/250 2026-04-07 09:29 by 纺大杨老师
[考研] 0857大类环境工程B区求调剂 +3 龚禹铭 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 277求调剂 +5 考研调剂lxh 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:03 by chy09050039
信息提示
请填处理意见