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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求帮忙！！目的基因Ct值很高
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rriangle

新虫 (初入文坛)

[求助] 求帮忙！！目的基因Ct值很高 已有2人参与

本人是新手，最近在做荧光定量PCR，用的是THERMO公司的仪器，cDNA稀释10倍后，内参GADPH ct值都在25左右，但是几个目的基因都在30多，要不然就是非数字，然后我又把cDNA稀释5倍，GADPH ct值在15左右，目的基因还是在30多，要不然就是非数字，好不容易有个目的基因跑出来了，结果实验组的相对量比对照组还低，我想知道是引物不好么？我的引物是生工的，还有内参跑出来了是不是说明我的cDNA没有问题？因为我是组织，以前也没做过，我怕被我污染了，多谢各位大神赐教啊。。。！！！
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1楼 2014-09-19 12:53:04
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南宫紫玉

新虫 (正式写手)
我也遇到了类似的情况，不过我的cDNA质量应该没有问题，跑出来的内参Ｃｔ值在２５左右，感觉不是很好，一直想调低一点呢！做了几个月了，试了好多方法，还正在摸索中．．．．．
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6楼2015-07-28 23:50:57
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南宫紫玉

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by by小宁 at 2015-07-08 14:25:00
亲  你后来怎么解决的啊？

我也遇到了类似的情况，不过我的cDNA质量应该没有问题，跑出来的内参Ｃｔ值在２５左右，感觉不是很好，一直想调低一点呢！做了几个月了，试了好多方法，还正在摸索中．．．．．你的问题解决了没呢？
赞一下 回复此楼
7楼2015-07-28 23:52:52
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