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flll2014

铜虫 (小有名气)

[交流] 组氨酸结合镍柱问题 已有5人参与

请问下大家,我的目的蛋白里面中间有两个组氨酸,但是离的特别远,会结和在镍柱上面吗?一般的组氨酸标签不是六个组氨酸标签吗?为什么我的目的蛋白也会结合在柱子上呢?
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flll2014

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by zlee at 2014-09-03 17:21:19
His 标签很小,你应该可以通过分子筛把它除去。

我的His标签很大
7楼2014-09-04 10:13:40
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salanero2000

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
能结合Ni应该是好事吧?
并不是说6个His都存在才能和Ni结合,只是为了保障有His暴露在外端。
2楼2014-08-27 10:09:59
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flll2014

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by salanero2000 at 2014-08-27 10:09:59
能结合Ni应该是好事吧?
并不是说6个His都存在才能和Ni结合,只是为了保障有His暴露在外端。

不是,我打算去his标签的,如果目的蛋白结合在镍柱上的话,那就没办法得到我的蛋白质了
3楼2014-08-27 10:56:01
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salanero2000

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by flll2014 at 2014-08-27 10:56:01
不是,我打算去his标签的,如果目的蛋白结合在镍柱上的话,那就没办法得到我的蛋白质了...

去His标签是不是需要看你目的蛋白和纯化标签之间是否存在酶切位点?
另外目的蛋白结合Ni柱洗脱不久不是可以得到你的蛋白质了吗?
4楼2014-09-01 11:16:55
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