应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 测序后发现碱基不一样了
51/1返回列表
查看: 3364  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

chenyanzhen

铁虫 (小有名气)

[求助] 测序后发现碱基不一样了 已有5人参与

构建质粒成功后去生工测序，测序结果中CCTCAGTGAGATTGTAGTGCTTGCTTAACAATGGGTTTTGGCTGCAAGTGCAATAATTCTTGCTTTGTGTGCCAGTTTTTATGTGGACATTTGATTACCTTTGCAC
变成了CCTCAGTGAGATTGTAGTGCTTGCTTAACAATGGGTTTTGGCTGCAAGTGCAATAATTCTTGCTTTGTGTGCCCGTTTTTATGTGGACATTTGATTACCTTTGCAC.在nvbi中对这两条序列进行BLAST，发现英文名称不一样，我要的是塔玛亚历山大藻四型，出现这种结果该怎么办啊？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
活在当下，充实自己
1楼 2014-08-15 17:06:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
chenyanzhen(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-19 20:39:00
引用回帖:
4楼: Originally posted by snoopytbw at 2014-08-16 22:48:32
测序是允许错误的，一般都有一点点错误率的哦，这个很正常的。你去生工测序，一般都是很多很多个单一起跑一个半导体芯片（二代测序），这个错误肯定不能避免的，一般不会给你再做一次毛细管电泳的。本来就便宜，做了 ...

构建质粒测序，走的是一代测序，也就是毛细管电泳，20多块钱野葛反应。建议楼主查看一下图谱，也就是ab1这个文件，看看是不是真的突变了，还是测序质量不高。
NCBI的序列是refseq，也就是说是参考序列，不一定要一模一样的。
赞一下 回复此楼
6楼2014-08-18 18:15:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chenyanzhen(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-16 12:49:45
一个点突变可以用融合PCR的方式将这个点重新突变回来……或者选择重新PCR。不同细胞中突变体的类型可能会有区别的，正常情况！祝顺利！
赞一下 回复此楼
他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
2楼2014-08-15 17:10:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chenyanzhen(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-16 12:49:53
有一个点突变很正常，如果是同义突变你觉得不影响就继续下去吧，如果你觉得不行的话，就重新PCR吧~没有办法！祝你顺利！
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-15 20:07:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
chenyanzhen(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-19 20:38:46
测序是允许错误的，一般都有一点点错误率的哦，这个很正常的。你去生工测序，一般都是很多很多个单一起跑一个半导体芯片（二代测序），这个错误肯定不能避免的，一般不会给你再做一次毛细管电泳的。本来就便宜，做了不亏本哇。大家都这样过来的。一个碱基而已哇。
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-16 22:48:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0805 316求调剂 +6 大雪深藏 2026-03-18 6/300 2026-03-24 22:13 by peike
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 085600材料与化工调剂 +8 A-哆啦Z梦 2026-03-23 13/650 2026-03-24 21:05 by greychen00
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +3 章小鱼567 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:46 by zhouxuan..
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 274求调剂 +5 顾九笙要谦虚 2026-03-24 5/250 2026-03-24 18:43 by jhhcooi
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 293求调剂 +6 加一一九 2026-03-24 6/300 2026-03-24 14:29 by JourneyLucky
[考研] 305分求调剂（食品工程） +5 Sxy112 2026-03-21 7/350 2026-03-24 12:27 by 544594351
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 求材料，环境专业调剂 +3 18567500178 2026-03-18 3/150 2026-03-23 23:50 by 热情沙漠
[考研] 335分 | 材料与化工专硕 | GPA 4.07 | 有科研经历 +4 cccchenso 2026-03-23 4/200 2026-03-23 23:00 by 徐ckkk
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 10/500 2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[基金申请] 学校已经提交到NSFC，还能修改吗？ 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭