24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1338  |  回复: 7

devil_liu

银虫 (正式写手)

[求助] 血浆蛋白沉淀后放置在进样小瓶半小时后仍然产生沉淀 已有6人参与

做药代动力学,前处理用蛋白沉淀,沉淀剂用含1%甲酸的-甲醇/乙腈(1:1)混合液,体积为血浆的3倍。沉淀后涡旋,高速离心,取上清进样,但发现进样小瓶放置半小时后会产生沉淀,达不到进样的要求。如果用甲醇/乙腈(1:1)混合液沉淀,不加甲酸的话(不加甲酸会影响峰形),放置半小时后就不会产生沉淀。
我自己猜想的原因:
1.我的微孔滤膜用的是有机相0.22微米的尼龙66材质,上网查询它遇到100%甲酸会溶解,但我的条件是1%甲酸。有没有耐酸的微孔滤膜??
特来求助,请高手给予建议。在线等,O(∩_∩)O谢谢
回复此楼

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

devil_liu

银虫 (正式写手)

送红花一朵
非常感谢!!!
2楼2014-08-15 17:19:52
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zbgood2009

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
devil_liu: 金币+4, ★★★很有帮助, 谢谢 已经另外换方法了 2014-08-18 15:37:37
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-31 19:14:13
很明显你的成分对酸特别敏感。你在看看别的文献有什么改善峰行的办法。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
Doyourbest!
3楼2014-08-16 07:15:40
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
devil_liu: 金币+5, 非常感谢。我已经加大有机溶剂的体积,不过实验室没有配备那么高转速的离心机。。。 2014-08-18 15:36:55
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-31 19:14:20
devil_liu: 金币+5 2014-09-23 17:52:46
这个沉淀很有可能是你的滤膜溶解造成的,可以试着再加大一下有机溶剂的体积(比如4:1或5:1),另外沉淀蛋白后可不过滤膜,高速(20000g以上离心力)离心10-20 min。
4楼2014-08-16 08:43:05
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

renzhichu525

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
devil_liu: 金币+3, 有帮助, O(∩_∩)O谢谢 2014-08-18 15:37:10
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-31 19:14:26
离心后直接进样或沉淀蛋白时不加甲酸进样时加入甲酸。
5楼2014-08-18 10:17:30
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-31 19:14:31
devil_liu: 金币+5 2014-09-23 17:52:24
你的蛋白沉淀不充分,其实进样前过下滤膜就可以了,一般滤膜都能耐酸,再说1%甲酸pH不会低于2,不会影响
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
6楼2014-08-30 17:26:17
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星星的眼睛

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
devil_liu: 金币+5 2014-09-23 17:52:20
不需要采用过膜的方法,直接高速离心,取上清进样,即可
7楼2014-09-02 18:03:35
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoniuer

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我试过在加了乙酸的血浆样品中加甲醇沉淀蛋白沉淀不了。还有先加甲醇的话可以很好沉淀,如果在沉淀中再加酸的话沉淀会溶解。这个现象和楼主描述有些相似。
8楼2015-01-03 19:17:02
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 devil_liu 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +4 LZH(等待调剂中 2026-04-10 4/200 2026-04-10 09:44 by JSWSK2012
[考研] 298求调剂 +7 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 7/350 2026-04-10 09:28 by luosha500
[考研] 344求调剂 +6 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 6/300 2026-04-10 09:23 by sailor_y
[考研] 一志愿中南大学物理学,英一66,求调剂 +3 长烟旖旎 2026-04-08 4/200 2026-04-09 21:27 by wutongshun
[考研] 278求调剂 +27 范婷娜 2026-04-07 31/1550 2026-04-09 20:49 by zhouxiaoyu
[考研] 291分调剂 +3 上岸小莹加油 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:28 by 1753564080
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +19 慕绝cc 2026-04-09 23/1150 2026-04-09 17:14 by 段伟艳
[考研] 化学调剂求助 +14 LULONG1 2026-04-03 19/950 2026-04-09 10:43 by chenxi233
[考研] 软件工程求调剂22软工296分求调剂,接受跨调 +4 yangchen2017 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:56 by 土木硕士招生
[考研] 281求调剂 +10 椰子蘑菇 2026-04-06 10/500 2026-04-08 11:43 by zzucheup
[考研] 288环境专硕,求调材料方向 +35 lllllos 2026-04-04 39/1950 2026-04-07 23:24 by 一只好果子?
[考研] 机械调剂 +3 zzzbcb 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:19 by hemengdong
[考研] 318求调剂 +5 李青山山山 2026-04-07 5/250 2026-04-07 18:24 by 蓝云思雨
[考研] 306求调剂 +3 15287505595 2026-04-03 3/150 2026-04-07 18:08 by 蓝云思雨
[考研] 333求调剂 +6 合乘杨习夕 2026-04-06 6/300 2026-04-07 09:44 by 猪会飞
[考研] 一志愿安徽某211 0703化学总分339求调剂 +7 晚风不晚 2026-04-04 7/350 2026-04-06 14:06 by houyaoxu
[考研] 考研调剂 +5 美丽的youth_ 2026-04-04 6/300 2026-04-06 06:57 by houyaoxu
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-04 4/200 2026-04-05 09:44 by zhq0425
[考研] 278求调剂 +14 范婷娜 2026-04-04 15/750 2026-04-04 22:15 by lqwchd
[考研] 学硕288调剂!!! +3 小王xw123 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:20 by 啵啵啵0119
信息提示
请填处理意见