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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】血浆样品做固相萃取前要不要沉淀蛋白？
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carina8559

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】血浆样品做固相萃取前要不要沉淀蛋白？已有4人参与

请问血浆样品做固相萃取之前要不要先沉淀蛋白？

因为做完固相萃取后要做液相检测，但是看见在很多文献里都是直接将血浆样品稀释以后就做SPE，然后洗脱液蒸干复溶就做HPLC，这样的话里面的蛋白不会堵住色谱柱吗？

如果要沉淀的话，请问是用乙腈还是高氯酸？

谢谢。
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1楼2010-05-21 13:05:39
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09yschen

金虫 (正式写手)
★ ★
waiy2001(金币+2):谢谢回复 2010-05-22 23:32:31
看你的目标物会不会和蛋白质结合了，如果会的话，当然要破坏蛋白（除非你是做药物结合率之类的），
除蛋白一般用乙腈，再离心，再旋转蒸发，我们做尿液相品是用这种方法，血浆的也差不多吧。
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2楼2010-05-22 21:13:53
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carina8559

新虫 (初入文坛)
除完蛋白还要旋转蒸发？不能直接上固相萃取柱？
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3楼2010-05-22 22:05:24
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waiy2001

荣誉版主 (著名写手)

至尊无上之尤文图斯
★
铁甲骑兵(金币+1):回复的很简明啊。 2010-05-27 07:03:31
如果用乙腈就不用蒸发了吧
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尤文舜天
4楼2010-05-22 23:34:08
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hellohygo

★
铁甲骑兵(金币+1):感谢指点。 2010-05-27 07:03:01
carina8559(金币+2):谢谢 2010-05-30 10:17:59
要不要旋干(一般是吹干)，要看你的固相萃取小柱，假如你用的是C18小柱，那么你用乙腈沉淀蛋白后直接上柱，肯定保留不住，因为乙腈是C18的洗脱溶剂。

可以先将血浆用水或缓冲盐稀释后上样试试
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5楼2010-05-23 09:52:13
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carina8559

新虫 (初入文坛)
有道理啊，我用的就是C18柱，难怪洗下来都没有我要的东西了。但是直接稀释血浆以后就上样，等到后面进液相检测的时候不会有蛋白损伤色谱柱吗？
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6楼2010-05-26 23:35:44
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