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carina8559

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[交流] 【求助】血浆样品做固相萃取前要不要沉淀蛋白？已有4人参与

请问血浆样品做固相萃取之前要不要先沉淀蛋白？

因为做完固相萃取后要做液相检测，但是看见在很多文献里都是直接将血浆样品稀释以后就做SPE，然后洗脱液蒸干复溶就做HPLC，这样的话里面的蛋白不会堵住色谱柱吗？

如果要沉淀的话，请问是用乙腈还是高氯酸？

谢谢。

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1楼 2010-05-21 13:05:39

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hellohygo

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★
铁甲骑兵(金币+1):感谢指点。 2010-05-27 07:03:01
carina8559(金币+2):谢谢 2010-05-30 10:17:59

要不要旋干(一般是吹干)，要看你的固相萃取小柱，假如你用的是C18小柱，那么你用乙腈沉淀蛋白后直接上柱，肯定保留不住，因为乙腈是C18的洗脱溶剂。

可以先将血浆用水或缓冲盐稀释后上样试试

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5楼2010-05-23 09:52:13

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09yschen

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★ ★
waiy2001(金币+2):谢谢回复 2010-05-22 23:32:31

看你的目标物会不会和蛋白质结合了，如果会的话，当然要破坏蛋白（除非你是做药物结合率之类的），
除蛋白一般用乙腈，再离心，再旋转蒸发，我们做尿液相品是用这种方法，血浆的也差不多吧。

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2楼2010-05-22 21:13:53

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carina8559

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除完蛋白还要旋转蒸发？不能直接上固相萃取柱？

3楼2010-05-22 22:05:24

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waiy2001

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铁甲骑兵(金币+1):回复的很简明啊。 2010-05-27 07:03:31

如果用乙腈就不用蒸发了吧

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尤文舜天

4楼2010-05-22 23:34:08

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