24小时热门版块排行榜    

查看: 2309  |  回复: 6

little-ant

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白沉淀法处理血浆样品的稳定性

如题,小弟做的某化合物在大鼠体内药代实验,血浆处理方法如下:200微升血浆+200微升乙腈+400微升甲醇涡旋2min后离心,上清液过虑,续滤液60微升进样分析hplv-uv.实验已经进行一学期了,血浆的处理结果都很好,空白血浆处理如图中的第一个图,4min后几乎没有杂质峰,但这两天做突然出现问题了,4min后出现一些明显的杂峰,如图中的第二第三图,且5.2min左右的杂峰与我的药体内代谢物的峰保留时间差不多一致,我怀疑过空白血浆、处理样品的甲醇和乙腈以及我的流动相是不是被污染,但经过一一换新的血浆、甲醇乙腈和流动相,问题还是照样出现,请问这问题出在哪里啊???
另外我实验的化合物的母体药物的预实验的血浆处理方法也同上,但给药时药物是溶解在20%的1.2-丙二醇里面,静脉注射,液相分析时每个样品都出现如图中的第4个图中接近8min处的峰,而且每个样品该峰面积都差不多,应该不是代谢物,请问这是为什么啊?
希望路过的各位战友帮我分析分析,小弟现在实验卡在这里了,焦虑的很啊,6月份就要中期考核了啊!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

little-ant

新虫 (小有名气)

都没有人出声,自己顶一下
2楼2012-05-15 15:51:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a83875785

铁杆木虫 (著名写手)


leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-06-21 09:01:12
最好能把你的样品的出峰时间调到10min以后,才能避免血浆内源物及母体化合物的辅料的干扰。
3楼2012-05-15 16:15:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kkbyb

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-06-21 09:01:19
如楼上所说,另外如果你进空白甲醇等溶剂也有就去换预柱或清洗进样阀吧
4楼2012-05-15 16:22:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

believe123

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-06-21 09:01:25
血浆处理方法不稳定,计算回收率的稳定性;色谱柱问题,色谱柱用的时间长,效率低了
5楼2012-06-20 22:20:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cj22xmc

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


leecius: 金币+1, 谢谢提供! 2012-06-21 09:01:31
你的血浆沉淀为什么要用乙腈和甲醇两种溶剂,另外建议进空白溶剂试试。
mc
6楼2012-06-21 08:35:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liu2011

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我之前也做过这个类似的项目,当时也发生过问题,样品要处理的干净,因为动物样品有很多动物源的杂质,对色谱柱柱效的影响还是比较大的,可以去测一下柱效看看,不好的话可能就跟样品没关系了,最好排除柱子的问题,或者进几针试剂的空白样
7楼2012-06-27 12:42:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 little-ant 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 一志愿安徽大学材料工程专硕313分,求调剂的学校 +8 Yu先生 2026-03-10 10/500 2026-03-14 01:04 by JourneyLucky
[考研] 312求调剂 +6 陌宸希 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:40 by JourneyLucky
[考研] 2026考研调剂+本科延边大学+山东大学+生物化学与分子生物学+有项目经验 +3 ccdsscjy 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:12 by JourneyLucky
[考研] 0805,333求调剂 +3 112253525 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:42 by JourneyLucky
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:06 by 星空星月
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 0856化工原理 +6 z2839474511 2026-03-10 6/300 2026-03-13 10:41 by houyaoxu
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考研] 290求调剂 +3 ADT 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:19 by peike
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀! 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
[考研] 0856材料与化工353分求调剂 +11 NIFFFfff 2026-03-09 11/550 2026-03-10 18:36 by suyuanhai
[考研] 085602化工求调剂 +7 董boxing 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:07 by BruceLiu320
[考研] 294 英二数二物化 求调剂 +6 米饭团不好吃 2026-03-09 6/300 2026-03-09 23:55 by barlinike
信息提示
请填处理意见