24小时热门版块排行榜    

查看: 1582  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

devil_liu

银虫 (正式写手)

[求助] 血浆蛋白沉淀后放置在进样小瓶半小时后仍然产生沉淀 已有6人参与

做药代动力学,前处理用蛋白沉淀,沉淀剂用含1%甲酸的-甲醇/乙腈(1:1)混合液,体积为血浆的3倍。沉淀后涡旋,高速离心,取上清进样,但发现进样小瓶放置半小时后会产生沉淀,达不到进样的要求。如果用甲醇/乙腈(1:1)混合液沉淀,不加甲酸的话(不加甲酸会影响峰形),放置半小时后就不会产生沉淀。
我自己猜想的原因:
1.我的微孔滤膜用的是有机相0.22微米的尼龙66材质,上网查询它遇到100%甲酸会溶解,但我的条件是1%甲酸。有没有耐酸的微孔滤膜??
特来求助,请高手给予建议。在线等,O(∩_∩)O谢谢
回复此楼

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

renzhichu525

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
devil_liu: 金币+3, 有帮助, O(∩_∩)O谢谢 2014-08-18 15:37:10
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-31 19:14:26
离心后直接进样或沉淀蛋白时不加甲酸进样时加入甲酸。
5楼2014-08-18 10:17:30
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

zbgood2009

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
devil_liu: 金币+4, ★★★很有帮助, 谢谢 已经另外换方法了 2014-08-18 15:37:37
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-31 19:14:13
很明显你的成分对酸特别敏感。你在看看别的文献有什么改善峰行的办法。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
Doyourbest!
3楼2014-08-16 07:15:40
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
devil_liu: 金币+5, 非常感谢。我已经加大有机溶剂的体积,不过实验室没有配备那么高转速的离心机。。。 2014-08-18 15:36:55
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-31 19:14:20
devil_liu: 金币+5 2014-09-23 17:52:46
这个沉淀很有可能是你的滤膜溶解造成的,可以试着再加大一下有机溶剂的体积(比如4:1或5:1),另外沉淀蛋白后可不过滤膜,高速(20000g以上离心力)离心10-20 min。
4楼2014-08-16 08:43:05
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-31 19:14:31
devil_liu: 金币+5 2014-09-23 17:52:24
你的蛋白沉淀不充分,其实进样前过下滤膜就可以了,一般滤膜都能耐酸,再说1%甲酸pH不会低于2,不会影响
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
6楼2014-08-30 17:26:17
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 帮忙看看fileCode +6 wwncly 2026-08-10 12/600 2026-08-11 13:01 by wwncly
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见