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诺曼底1227

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 关于real-time PCR的一些问题

关于real time PCR，有几个问题请教各位达人。
之前我在一个实验室做real time PCR，检测方法是检测GAPDH (housekeeping gene)和目标基因的荧光值，然后算ΔCt, 现在换到另外一个实验室，这边是计算ΔΔCt，这种算法之前没做过，所以不会到有没有某位达人能指导一下？多谢
另外，现在所在实验室在正式跑PCR前，会做一系列cDNA的浓度梯度，然后通过检测结果来选择最佳浓度梯度，这个选择标准是什么样的？
还有就是我们实验室用的real -time PCR机子，在设定程序时，可以选择哪段过程记录检测结果，哪段过程不用检测记录，我想请教一下最后用来计算的，也就是需要记录的是哪段过程？扩展，还是annealing?
多谢
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1楼 2014-08-14 22:04:29
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vapordw

新虫 (初入文坛)
啥机器？一般有现成的软件做结果- -不需要手动算
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2楼2014-08-18 15:50:36
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