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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于Real Time PCR
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dongxiao1214

新虫 (小有名气)

[交流] 关于Real Time PCR 已有2人参与

做定量PCR可以直接拿提取的基因组做模板吗，为什么非要提取总RNA逆转录再扩增呢？
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1楼 2012-08-03 11:15:16
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-03 13:59:32
举个简单的例子，假设你的基因在基因组有一个拷贝，转录出的RNA有一个拷贝；另一种条件下这个基因转录了2个拷贝。这样算出来的话实际应该是1：2(反转录出的1和2个拷贝)，而用基因组的话则是1：1(基因组各有一个拷贝，RNA不能作为DNA聚合酶的模板)。
也就是说基因组的拷贝会影响转录量，这也就是为什么要先去DNA在反转录。同时RNA不能做RT的模板。
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2楼2012-08-03 11:22:51
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dongxiao1214

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhuifeng7000 at 2012-08-03 11:22:51
举个简单的例子，假设你的基因在基因组有一个拷贝，转录出的RNA有一个拷贝；另一种条件下这个基因转录了2个拷贝。这样算出来的话实际应该是1：2(反转录出的1和2个拷贝)，而用基因组的话则是1：1(基因组各有一个拷贝 ...

原来如此，谢谢了
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3楼2012-08-03 13:15:54
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jxm520zyc

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
DNA也是可以用来做的，可以做SNP分型，但是，如果做表达量的差异的话，那就需要做提RNA做反转了~我不知道你是做什么的？
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学习中~
4楼2012-08-03 14:15:15
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