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诺曼底1227

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 关于real-time PCR的一些问题

关于real time PCR,有几个问题请教各位达人。
之前我在一个实验室做real time PCR,检测方法是检测GAPDH (housekeeping gene)和目标基因的荧光值,然后算ΔCt, 现在换到另外一个实验室,这边是计算ΔΔCt,这种算法之前没做过,所以不会到有没有某位达人能指导一下?多谢
另外,现在所在实验室在正式跑PCR前,会做一系列cDNA的浓度梯度,然后通过检测结果来选择最佳浓度梯度,这个选择标准是什么样的?
还有就是我们实验室用的real -time PCR机子,在设定程序时,可以选择哪段过程记录检测结果,哪段过程不用检测记录,我想请教一下最后用来计算的,也就是需要记录的是哪段过程?扩展,还是annealing?
多谢
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vapordw

新虫 (初入文坛)

啥机器?一般有现成的软件做结果- -不需要手动算
2楼2014-08-18 15:50:36
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