应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 有关双酶切时间及质粒添加量的确定
51/1返回列表
查看: 4413  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)

[求助] 有关双酶切时间及质粒添加量的确定 已有3人参与

我用的thermo 的fastdigest进行双酶切，说明书上说5-10分钟就可以完成酶切，会不会时间太短了呀，有没有人用过这种酶，介绍下经验吧，还有质粒的添加量该怎么确定呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-04 09:36:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cckk_2000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

质粒如果是载体的话，建议双酶切的时候量少一些。你抽提质粒之后不是要测浓度吗，根据浓度确定大概1-2ug质粒双酶切即可。时间可以适当延长，主要是时间过长可以引起星号活性，所以你应该好好看看说明书。
赞一下 回复此楼
科研炮灰
7楼2014-12-09 09:08:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

zyyyyyyy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-04 23:21:32
按照说明书上操作，如果觉得不放心，酶切时间稍稍长一点也没什么大影响。质粒的添加量要看你的体系是多大的啦
赞一下 回复此楼
2楼2014-07-04 10:42:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pudding9696

无虫 (小有名气)
楼主参考下这个 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7467723&fpage=1
赞一下 回复此楼
3楼2014-07-04 14:14:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zyyyyyyy at 2014-07-04 10:42:48
按照说明书上操作，如果觉得不放心，酶切时间稍稍长一点也没什么大影响。质粒的添加量要看你的体系是多大的啦

谢谢
回复此楼
4楼2014-07-04 14:23:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭