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RNA变性电泳PAGE，带有重影 已有1人参与
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15%的变性 尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳，样品是总RNA，跑出来的电泳带有重影，使用的条件是1XTBE，60V，电泳5h，使用的marker为非变性的marker，跑不会看是正常的。但是怎么其他目的带也有重影呢？望各位虫指点。 同时也跑了15%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，条件一样，很正常，带分得很开，样品没有问题。 变性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳结果：  20140613-RNA-变性PAGE.jpg |
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biostar2009
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初手干这个，这是最常见的问题 urea极易析出，不断的在从胶里面扩散出来，聚集在well里面，loading buffer的密度不如urea高，urea实在是太高了，所以urea-PAGE上样前，注意是刚刚上样前，要用注射器使命的吹孔，把尿素吹出来。同时上样速度要快，因为尿素还在析出，尤其是well两侧的析出，时间长了样品即便上进去是好好的，也会被抬升和压成锥形。 |
3楼2014-07-02 10:14:01
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biostar2009
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