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求助!小分子重组蛋白不表达
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aayqaa
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求助!小分子重组蛋白不表达
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最近在做一个小分子蛋白的表达,目的基因230bp左右,与PET21a载体连接,测序正确后转入BL21,37℃ 1mM IPTG诱导4小时未见表达。基因无稀有密码子,蛋白无细胞毒性,想知道这种情况该怎么办?有没有比较适合表达小分子蛋白的菌或者有什么表达小分子蛋白的好方法?万分感谢!!
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【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带
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2014-06-26 20:20:30
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2014-06-26 22:11:30
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很有帮助
2014-06-27 19:38:43
建议你用较低浓度的IPTG,我用过最低浓度是0.1mM,效果不错,当然这也需要你延长诱导的时间。
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人生贵在行动,迟疑不决时,不妨先迈出小小一步。
2楼
2014-06-26 21:35:14
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2014-06-27 19:39:47
是没有表达,还是表达后以包涵体的形式存在?
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行至水穷处,坐看云起时
3楼
2014-06-26 22:48:17
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飞约疯人院
at 2014-06-26 21:35:14
建议你用较低浓度的IPTG,我用过最低浓度是0.1mM,效果不错,当然这也需要你延长诱导的时间。
我试试,谢谢
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4楼
2014-06-27 19:38:20
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at 2014-06-26 22:48:17
是没有表达,还是表达后以包涵体的形式存在?
全菌电泳未见表达,和空载一样
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2014-06-27 19:39:28
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aayqaa
at 2014-06-27 19:39:28
全菌电泳未见表达,和空载一样
...
空载加iPTG了吗
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6楼
2017-04-07 12:20:09
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pennchem
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是没有表达,还是表达后以包涵体的形式存在?
怎么跑包涵体蛋白胶
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2017-04-07 12:21:04
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