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想检测一个大约4kD 的小肽片段,western blot 一直没有条带怎么办
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wangxueflower
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[交流]
想检测一个大约4kD 的小肽片段,western blot 一直没有条带怎么办
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最近一直在做一个4kD小肽片段的western, 试过一般的SDS-Page,也尝试过tricine-SDS-page, 但是一直检测不到条带,
很是郁闷啊,这个小肽是一个前体蛋白经过酶切后的产物。我用的抗体也是一般常用的特异性抗体。上样量是30ug/孔。
是不是上样量太少的原因啊? 还有是不是因为这个小肽的产量不高? 转膜方面, 我用的是100V 冰上转膜一个半小时,是不是转过了?
请虫友们给点建议吧
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1楼
2014-06-12 12:39:37
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yipan
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youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩!
2014-07-08 10:45:00
上样量加大,转膜1 h足够。分子量太小了,缩短转膜时间。
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2楼
2014-06-12 13:09:37
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