应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR阴性对照出条带，但是内参没有，换了一管新的引物还是有条带
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
191/2返回列表12下一页
查看: 2909  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

karuirui

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR阴性对照出条带，但是内参没有，换了一管新的引物还是有条带 已有4人参与

请教各位大神，PCR阴性对照（没有cDNA，只有引物、水、taq酶）出条带，而且大小正好是我的目的基因大小，循环32圈，但是内参的阴性没有条带，这是为什么呢！以为是引物被污染了，但是换了一管新的，还是有目的条带！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-06-08 16:52:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
karuirui(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-06-08 20:50:15
水或试剂被污染了
或者是你记错了

一般这种情况，阴性出来肯定不正常，除非你的片段刚好100bp左右，跟引物二聚体大小差不多，这种情况也存在。

建议把所有试剂换了重新做一边，如果还出来，极有可能是二聚体
赞一下 回复此楼
天行健
2楼2014-06-08 17:26:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karuirui

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-06-08 17:26:04
水或试剂被污染了
或者是你记错了

一般这种情况，阴性出来肯定不正常，除非你的片段刚好100bp左右，跟引物二聚体大小差不多，这种情况也存在。

建议把所有试剂换了重新做一边，如果还出来，极有可能是二聚体

我所的东西都换了，包括水……还是有。目的条带的大小是二百多。
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-09 10:52:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by karuirui at 2014-06-09 10:52:29
我所的东西都换了，包括水……还是有。目的条带的大小是二百多。...

神了个奇，难道你的引物被污染了？这个很少见啊，你试一下，换组其他引物来扩增你的cDNA,如果依然可以扩增出来200bp，额，见鬼了
赞一下 回复此楼
天行健
4楼2014-06-09 11:41:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xcchh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是出现假阳，引物不行？
赞一下 回复此楼
5楼2014-06-09 15:46:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karuirui

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-06-09 11:41:26
神了个奇，难道你的引物被污染了？这个很少见啊，你试一下，换组其他引物来扩增你的cDNA,如果依然可以扩增出来200bp，额，见鬼了...

恩，已经重新合成引物了
赞一下 回复此楼
6楼2014-06-09 17:53:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karuirui

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xcchh at 2014-06-09 15:46:53
是不是出现假阳，引物不行？

重复多次了，一直有，不知道怎么回事
赞一下 回复此楼
7楼2014-06-09 17:54:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xcchh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by karuirui at 2014-06-09 17:54:28
重复多次了，一直有，不知道怎么回事...

那应该是你的引物质量不是很好
赞一下 回复此楼
8楼2014-06-19 11:21:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

纯水仪可能长藻类，水里有藻类DNA，如果运气不好，你的引物刚好可以扩增
赞一下 回复此楼
9楼2014-06-19 16:52:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kekebing

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by karuirui at 2014-06-09 17:54:28
重复多次了，一直有，不知道怎么回事...

请问你污染的问题解决了吗？我现在也遇到了类似的问题
赞一下 回复此楼
随其自然
10楼2014-06-26 15:59:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 karuirui 的主题更新
191/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703总分331求调剂 +10 ZY-05 2026-04-04 13/650 2026-04-05 11:03 by xiayan13521
[考研] 083200 333求调剂 +3 十二！！ 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:28 by barlinike
[考研] 285求调剂 +11 哦呦呼o 2026-04-04 11/550 2026-04-05 08:15 by 544594351
[考研] 313求调剂 +3 海日海日 2026-04-04 3/150 2026-04-05 07:48 by 544594351
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-03-31 5/250 2026-04-04 19:45 by 1753564080
[考研] 309求调剂 +6 刘刘刘1231 2026-04-02 7/350 2026-04-04 13:41 by liucky
[考研] 334求调剂 +8 曾仰之 2026-04-03 8/400 2026-04-04 11:16 by w_xuqing
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +9 hanamiko 2026-03-30 9/450 2026-04-04 11:04 by 猪会飞
[考研] 0710生物学336分求调剂 +6 kiyy 2026-04-01 8/400 2026-04-04 10:10 by kiyy
[考研] 材料科学与工程339求调剂 +12 hyz0119 2026-03-31 13/650 2026-04-03 18:33 by ls刘帅
[考研] 372分材料与化工（085600）一志愿湖南大学求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-03 4/200 2026-04-03 17:58 by Jimmyandyou
[考研] 283求调剂 +3 jiouuu 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:28 by jiouuu
[考研] 22408 266求调剂 +3 masss11222 2026-04-02 3/150 2026-04-02 18:11 by 笔落锦州
[考研] 301求调剂 +4 细胞相关蛋白 2026-04-02 8/400 2026-04-02 16:30 by 271179835
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +9 双马尾痞老板2 2026-04-01 9/450 2026-04-02 12:14 by oooqiao
[考研] 08开头看过来！！！ +4 wwwwffffff 2026-03-31 6/300 2026-04-02 11:42 by 均值回归
[考研] 江苏科技大学招材料研究生 +4 Su032713. 2026-04-01 5/250 2026-04-01 22:03 by cccchenso
[考研] 303分 0807学硕求调剂 +3 TYC3632 2026-04-01 3/150 2026-04-01 19:24 by lwk2004
[考研] 322求调剂 +8 三水sss 2026-04-01 8/400 2026-04-01 10:19 by 唐沐儿
[考研] 085404 22408 315分 +5 zhuangyan123 2026-03-31 6/300 2026-03-31 13:48 by limeifeng
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭