| 查看: 836 | 回复: 1 | |||
[求助]
切胶回收DNA分子变大，连不上T载体 已有1人参与
|
|
最近在扩一个转录因子（1400bp），因后期需要做原核表达，故设计酶切位点扩增（kpnI BamHI）。条带扩出来，大小正确。送去测序，报告失败（因为用扩增引物测了个单向，但是测序结果显示前面600多bp是我的东西，而且还带kpnI我设计的酶切位点），但是回收时候，总是发现条带变大（如图，PCR重复3次，应该不是跑胶问题）。而且条带总是连不上T载体 注：我同时在做两个转录因子，跟这个同一家族的转录因子已经原核表达做了出来，步骤一致，同时进行，应该试剂药品什么的没啥问题。但这个迟迟连不上，想问问有没有类似的情况，如何解决？多谢  回收前.jpg  回收后.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有144人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- PCR片段连接载体，转化不出阳性克隆，求解?
已经有14人回复
- 关于PCR产物胶回收连T载的问题～
已经有7人回复
- 载体去磷酸化后的回收问题
已经有21人回复
- 载体与片段连不上
已经有13人回复
- 双酶切之后，基因变小了
已经有10人回复
- 用胶回收产物PCR的问题
已经有9人回复
- 最近实验室T载体连接一直都假阳性
已经有11人回复
- 目的基因连T载体能连上，双酶切后连不上HTB质粒，都三个月了，纠结啊。。。
已经有21人回复
- 克隆基因为什么一直连不到载体上
已经有11人回复
- T载体的阴性对照菌落比实验组多
已经有3人回复
- 载体为什么连不上呢
已经有6人回复
- 纠结的分子实验，双酶切连不上，求助
已经有14人回复
- 片段总是连不到T载体上
已经有22人回复
- 关于双酶切后回收的问题
已经有12人回复
- t载体酶切问题
已经有15人回复
- 双酶切后目的条带很淡，回收不到
已经有15人回复
- pcr产物胶回收浓度低，能不能和T载体连接
已经有16人回复
- PMD19-T载体连接不上428bp的片段
已经有20人回复
- 载体总是连不上，已经一个月了~真心求助，详细在帖子里
已经有7人回复
- PCR ， 双酶切，连接问题
已经有17人回复
- 回收片段连接以后为什么变短了？在线等
已经有6人回复
- pGEM-T Easy载体的相关问题-讨论
已经有7人回复
- PCR产物与T载体连不上 求助
已经有29人回复
- 【求助/交流】哪种T载体可以克隆6kb的片段。
已经有9人回复
飞约疯人院
专家顾问 (著名写手)
科学怪人
-
专家经验: +140 - MolEPI: 2
- 应助: 308 (大学生)
- 金币: 1075.5
- 散金: 8294
- 红花: 65
- 沙发: 5
- 帖子: 1996
- 在线: 266.1小时
- 虫号: 3188421
- 注册: 2014-05-07
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
2楼2014-06-06 14:55:18