应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 胶回收 连接
51/1返回列表
查看: 1984  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

周兵lofter

新虫 (小有名气)

[求助] 胶回收 连接 已有4人参与

胶回收的产物是不纯的 有4000和2000. 但我想进行连接转化，之后挑菌，做菌液pcr，但跑胶后出现的都是2000的。4000的没连进去。请问的是能不能延长连接反应时间解决这个问题。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
乐观向上 积极拼搏 热爱生命 用心生活
1楼 2014-06-06 10:41:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
周兵lofter(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-06 19:18:20
将胶回收的产物再次进行PCR，电泳切出特异条带，然后胶回收。。。。。。
赞一下(1人) 回复此楼
人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
5楼2014-06-06 13:37:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-06-06 12:36:29
既然2k和4k
你为什么不跑的长点，然后单独切出来4k啊？
延长连接时间，是可以让链接效率提高
但是问题是，4k的提高比起2k的提高，可以忽略不计
另外，在生长过程中，4k的会很快被2k的给掩盖过去
最后你只能挑出2k的片段，4k的可能只有不到百分之一，那工作量啊，太大了

强烈建议你重新切胶，我们相隔200bp的都可以切开
赞一下 回复此楼
天行健
2楼2014-06-06 10:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周兵lofter

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by youlinglyw at 2014-06-05 20:53:08
既然2k和4k
你为什么不跑的长点，然后单独切出来4k啊？
延长连接时间，是可以让链接效率提高
但是问题是，4k的提高比起2k的提高，可以忽略不计
另外，在生长过程中，4k的会很快被2k的给掩盖过去
最后你只能挑出 ...

亲  我也是这么想的 胶回收胶回收。也分的很开  然后切。。。但还是有2000的条带。。然后我接着在做胶回收，最后一次只能隐约的看到上面那条了。。。但连接转化后，没有长出菌落。。。  但是最后这次我是不能确定有没有2000了，因为4000的条带也很微弱了。。。
赞一下 回复此楼
乐观向上 积极拼搏 热爱生命 用心生活
3楼2014-06-06 11:07:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

grase

捐助贵宾 (职业作家)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
周兵lofter(kx444555代发): 金币+2, 鼓励交流 2014-06-06 12:36:50
引用回帖:
3楼: Originally posted by 周兵lofter at 2014-06-06 11:07:38
亲  我也是这么想的 胶回收胶回收。也分的很开  然后切。。。但还是有2000的条带。。然后我接着在做胶回收，最后一次只能隐约的看到上面那条了。。。但连接转化后，没有长出菌落。。。  但是最后这次我是不能确定有 ...

4000的再扩增点吧。可以过夜连，连时间长点。
如果量少，阳性克隆也少。
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-06 11:14:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] FileCode能看出啥？ +7 要乐观耀哥 2026-08-10 15/750 2026-08-10 19:29 by 要乐观耀哥
[基金申请] filecode +8 documentary 2026-08-10 8/400 2026-08-10 19:20 by loufangrui
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 11/550 2026-08-10 17:09 by 六两废铜
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +14 Lanmanbaby 2026-08-09 22/1100 2026-08-10 14:57 by wwncly
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭