24小时热门版块排行榜

返回列表

desheng101

木虫 (正式写手)

应助: 16 (小学生)
金币: 1926.8
散金: 30
红花: 3
帖子: 394
在线: 73.7小时
虫号: 1110789
注册: 2010-09-29
性别: GG
专业: 细胞周期与调控

[求助] 大提质粒胶回收的问题

大提质粒，上样1ul，浓度我感觉还很高，一直出现小于超螺旋一条2500bp左右的条带，一直百思不得其解，后来上论坛根据自己的实验结果，觉得2500bp是裂解过程中出现的不正常质粒。但是还是想把超螺旋切下来做一个转化，于是第二个问题出现了，切下来的超螺旋胶回收再次电泳，发现出现了3条带。想问问各位下面2个问题
1，2500bp的条带出现的原因是什么
2，超螺旋胶回收3条带出现的原因是什么？是不是质粒的3种形态？

[ Last edited by desheng101 on 2013-7-10 at 17:39 ]

回复此楼

» 猜你喜欢

Tosylate-DPA-714介导¹⁸F-DPA-714 PET成像的前沿进展已经有0人回复
I-BRD9: BRD9溴结构域化学探针，BET选择性>700倍已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有111人回复
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner 已经有0人回复
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner 已经有0人回复
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner 已经有0人回复
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner 已经有0人回复
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂已经有0人回复
DMXAA：从血管破坏剂到STING通路研究的关键工具分子 | Biochempartner 已经有0人回复
靶向PD-L1的人源化单克隆抗体阿特珠单抗已经有0人回复
"探针之父"(+)-JQ-1如何改变表观遗传研究 | Biochempartner 已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

基因与载体连接转化后涂版长出了菌，提质粒却没有提出来，不知道什么原因？？已经有17人回复
Nhe I和Hind III 双酶切pcDNA3.1(+)和目的片段2300bp，却连不上，求各位帮忙啊已经有17人回复
双酶切后切胶回收已经有34人回复
请教：胶回收和提质粒时用的柱子里的膜是什么材料啊，原理是怎么样的已经有5人回复
有没有用过XmnI这个酶的?酶切后连接需要注意什么问题么？已经有12人回复
各种综合问题：酶切胶回收质粒浓缩测浓度已经有7人回复
崩溃了难题跪求解答：质粒提不出，酶切切不开已经有30人回复
菌液PCR出现杂带是什么原因？已经有17人回复
胶回收求助已经有6人回复
做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why??? 已经有24人回复
提质粒出现4条带？已经有15人回复
PCR ，双酶切，连接问题已经有17人回复
提质粒遇到问题已经有13人回复
DGGE胶回收问题已经有13人回复
载体连接已经有7人回复
【求助/交流】请教NEB的pmeI的酶切体系已经有7人回复

1楼 2013-07-10 17:37:13

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
desheng101: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-07-11 09:06:02
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-07-11 12:19:57

1. 你的目标质粒是多大的？
2. 关于超螺旋带回收后出现三条带的原因我想应该是这样：超螺旋是质粒的折叠构象，在胶回收过程中造成部分折叠破坏，形成开环和线性构象。
不知道你提出来的质粒超螺旋的比例。一般质量好的超螺旋占很大比例，没有必要从胶上再回收超螺旋质粒。

赞一下

回复此楼

2楼2013-07-11 07:31:43

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

MolEPI: 7
应助: 75 (初中生)
金币: 690.2
红花: 8
帖子: 340
在线: 97.2小时
虫号: 1473815
注册: 2011-11-03
性别: GG
专业: 生物化学

引用回帖:

2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-11 07:31:43
1. 你的目标质粒是多大的？
2. 关于超螺旋带回收后出现三条带的原因我想应该是这样：超螺旋是质粒的折叠构象，在胶回收过程中造成部分折叠破坏，形成开环和线性构象。
不知道你提出来的质粒超螺旋的比例。一般质量 ...

同意二楼

回复此楼

伟大航线....