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郝连芷水

木虫 (小有名气)

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专业: 药物毒理

[求助] 胶回收求助

大家好，我做pcr产物胶回收，最后用核酸仪测浓度，发现A230很高，导致A260/A230只有0.06，这肯定是碳水化合物污染了，是不是琼脂糖进去了？而且核酸浓度只有20ng/µl，大家出现过这样的问题吗？咋改善呢？

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1楼 2011-12-26 17:17:35

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longrna

新虫 (正式写手)

MolEPI: 7
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专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+5, MolEPI+1): Good！热心！专业！决定授予专家指数一枚！ 2011-12-27 16:13:37
郝连芷水(金币+2): ★★★★★最佳答案 2011-12-27 19:34:22

一般来说260/230比值不影响很多实验。
你的胶回收产物准备用来做什么？
所以公司的胶回收试剂盒都存在260/230偏低的情况，目前还没有很好的解决办法。不过很多实验也验证过此比值低不影响后续实验。
造成此比值偏低的原因有两个：
1.胶回收过程中所使用的溶胶液为高盐溶液，虽然有后面的乙醇洗涤液洗，但没办法很好去除这个盐。
2.一般来说胶回收的产物量小，A260本来不高，所以得到的比值也不可尽信。很多仪器在A260小的时候已经超出了仪器的可信范围。