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18252091017新虫 (初入文坛)
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目的条带P不出来！已有2人参与
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本人最近一直在提RNA,逆转录，PCR，可是总是P不出来我的目的条带，换了两次引物（第一次从一篇中文文献中查到的，第二次从一篇英文文献中查到的），结果都P不出来。我拿我逆转录出来的cDNA去p别人的引物和内参，都能P出来，可P我自己的引物总是P不出来。请问各位， 1、是我引物的问题吗？可是换了两次了，还是不行。 2、我引物稀释没有在超净台里做，打开盖子之前先3500转离心5分钟，再用nuclease-free water稀释，这一步应该没问题吧？因为我也是同样方法稀释的内参，结果内参p出来了。 3、倘若是我引物问题，请问各位选取引物时是自己设计？还是文献中查找？ 求各位大侠指点，谢谢各位了！  0423 21号cDNA PCR vegf---RNA-_副本.jpg  0423 21号cDNA PCR vegf---RNA-.JPG |
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