24小时热门版块排行榜    

查看: 2258  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhaoxiaopang

金虫 (小有名气)

[求助] 菌落PCR 之前能P出来,后来就重复不出来了 已有5人参与

前两天菌落刚长出来的时候做的PCR,感觉菌落比较小不晓得能不能P出来就试了试,结果能出现目的条带,然后等菌又张了两天后菌落变大后又做了两次重复,菌落是一样的,程序,酶都是一样的,可结果就是什么都么有,很郁闷,不知道什么原因,求助啊!!!真的想不通哪个环节出错了,菌落都是一样的,条件也都是一样的,到底是为什么呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zep616745243

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaoxiaopang at 2014-04-29 10:14:50
那是说我的菌都是假阳性?但是刚转化后挑的菌落做的PCR也是能P出来,只是引物特异性不太好,后来换的引物又P的,结果就出现这样子。我P的是基因组上的片段,跟质粒么有关系...

额,不好意思我以为你的是重组质粒菌,那就再试试你之前的引物呗,行的话就是引物的问题了
只有不断地失败才会成功
5楼2014-04-29 10:22:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhaoxiaopang(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-29 18:19:12
菌落PCR假阳性很正常,质粒丢失也不是没有可能
只有不断地失败才会成功
2楼2014-04-29 10:06:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windleakey

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道什么原因,我都是把单菌落摇起来,做菌液pcr,其他的菌液也方便保存,这样不容易出错
3楼2014-04-29 10:11:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaoxiaopang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zep616745243 at 2014-04-29 10:06:30
菌落PCR假阳性很正常,质粒丢失也不是没有可能

那是说我的菌都是假阳性?但是刚转化后挑的菌落做的PCR也是能P出来,只是引物特异性不太好,后来换的引物又P的,结果就出现这样子。我P的是基因组上的片段,跟质粒么有关系
4楼2014-04-29 10:14:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +5 大火山小火山 2026-03-16 7/350 2026-03-17 10:26 by peike
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +15 不知道叫什么! 2026-03-15 17/850 2026-03-17 10:13 by Sammy2
[考研] 293求调剂 +5 zjl的号 2026-03-16 6/300 2026-03-17 10:13 by zhyzzh
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历,论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 344求调剂 +3 knight344 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:42 by 无际的草原
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-15 6/300 2026-03-16 08:00 by wang_dand
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 310求调剂 +3 【上上签】 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:16 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 【0856】化学工程(085602)313 分,本科学科评估A类院校化学工程与工艺,诚求调剂 +7 小刘快快上岸 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:06 by ruiyingmiao
[考研] 314求调剂 +7 无懈可击的巨人 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:40 by JourneyLucky
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
信息提示
请填处理意见