24小时热门版块排行榜    

查看: 2256  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhaoxiaopang

金虫 (小有名气)

[求助] 菌落PCR 之前能P出来,后来就重复不出来了 已有5人参与

前两天菌落刚长出来的时候做的PCR,感觉菌落比较小不晓得能不能P出来就试了试,结果能出现目的条带,然后等菌又张了两天后菌落变大后又做了两次重复,菌落是一样的,程序,酶都是一样的,可结果就是什么都么有,很郁闷,不知道什么原因,求助啊!!!真的想不通哪个环节出错了,菌落都是一样的,条件也都是一样的,到底是为什么呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

windleakey

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道什么原因,我都是把单菌落摇起来,做菌液pcr,其他的菌液也方便保存,这样不容易出错
3楼2014-04-29 10:11:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhaoxiaopang(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-29 18:19:12
菌落PCR假阳性很正常,质粒丢失也不是没有可能
只有不断地失败才会成功
2楼2014-04-29 10:06:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaoxiaopang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zep616745243 at 2014-04-29 10:06:30
菌落PCR假阳性很正常,质粒丢失也不是没有可能

那是说我的菌都是假阳性?但是刚转化后挑的菌落做的PCR也是能P出来,只是引物特异性不太好,后来换的引物又P的,结果就出现这样子。我P的是基因组上的片段,跟质粒么有关系
4楼2014-04-29 10:14:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zep616745243

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhaoxiaopang at 2014-04-29 10:14:50
那是说我的菌都是假阳性?但是刚转化后挑的菌落做的PCR也是能P出来,只是引物特异性不太好,后来换的引物又P的,结果就出现这样子。我P的是基因组上的片段,跟质粒么有关系...

额,不好意思我以为你的是重组质粒菌,那就再试试你之前的引物呗,行的话就是引物的问题了
只有不断地失败才会成功
5楼2014-04-29 10:22:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 341求调剂 +5 捣蛋猪猪 2026-03-11 5/250 2026-03-17 06:56 by Muziwl
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +3 张vvvv 2026-03-15 5/250 2026-03-16 20:25 by 张vvvv
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂,求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +5 d如愿上岸 2026-03-12 8/400 2026-03-16 15:19 by peike
[考研] 机械专硕调剂 +3 笨笨兔子 2026-03-12 3/150 2026-03-15 20:02 by 栗子粥?
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧, 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 307求调剂 +7 超级伊昂大王 2026-03-10 7/350 2026-03-14 00:49 by JourneyLucky
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 求调剂,一志愿江南大学环境工程085701 +3 Djdjj12 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:31 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 277求调剂 +4 anchor17 2026-03-12 4/200 2026-03-13 11:15 by 白夜悠长
[考研] 283求调剂,材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
[考研] 085600 材料与化工 295 求调剂 +10 dream…… 2026-03-10 12/600 2026-03-12 13:46 by dream……
信息提示
请填处理意见